[發明專利]數字PCR定量檢測PML-RARA融合基因的試劑盒及方法

在審

• 申請號: 202011487473.0
• 申請日: 2020-12-16
• 公開（公告）號: CN112626208A
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 蔣析文;朱小亞;王麗芳;徐小解;黃志文
• 申請（專利權）人: 中山大學達安基因股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 上海助之鑫知識產權代理有限公司 31328
• 代理人: 陳詳

1.一種用于檢測PML-RARA融合基因的引物對集，其特征在于，所述引物對集包括：

第一引物對，所述第一引物對包括如SEQ ID NO.:1所示的正向引物，和/或如SEQ IDNO.:2所示的正向引物；以及，如SEQ ID NO.:3所示的反向引物。

2.如權利要求1所述的引物對集，其特征在于，所述引物對集還包括：

第二引物對，所述第二引物對組包括如SEQ ID NO.:4所示的正向引物；和，如SEQ IDNO.:5所示的反向引物。

3.一種檢測PML-RARA融合基因的探針集，其特征在于，所述探針集包括：SEQ ID NO.6所示的第一探針；

優選地，所述探針集還包括：SEQ ID NO.7所示的第二探針。

4.一種用于檢測PML-RARA融合基因的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1所述的引物對集。

5.如權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括權利要求3所述的探針集。

6.如權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括第一容器，所述第一容器內包含引物探針混合液，所述引物探針混合液中包含SEQ ID NO：1、SEQ ID NO.:2、SEQ IDNO.:3、SEQ ID NO.:4、SEQ ID NO.:5、SEQ ID NO.:6、和SEQ ID NO.:7所示的多核苷酸序列。

7.如權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括第二容器，所述第二容器內包含ddPCR預混液。

8.如權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括第三容器，所述第三容器內包含陽性對照；和/或

所述試劑盒還包括第四容器，所述第四容器內包含陰性對照。

9.一種檢測PML-RARA融合基因的方法，所述方法包括步驟：

(1)提供待檢測對象的RNA核酸樣本，并進行RNA反轉錄成cDNA；

(2)制備ddPCR反應體系并進行ddPCR檢測：

其中，所述ddPCR反應體系包括：步驟(1)制備的cDNA樣本、權利要求1的引物對集、和權利要求3所述的探針集。

10.第一方面所述的引物對集、和/或本發明第二方面所述的探針集的用途，用于制備ddPCR檢測試劑盒，所述ddPCR檢測試劑盒用于檢測PML-RARA融合基因。