[發(fā)明專利]一種血漿circRNA標(biāo)志物及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011485082.5
• 申請(qǐng)日: 2020-12-16
• 公開（公告）號(hào): CN112410434A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許文榮;李榮;王君怡;錢暉;張徐;侯杰;王冬麗;邱雙洋;張帆
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12N15/113
• 代理公司: 重慶市信立達(dá)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50230
• 代理人: 陳炳萍

本發(fā)明屬于生物及分子診斷技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種血漿circRNA標(biāo)志物及其應(yīng)用。標(biāo)志物為hsa_circ_000613，所述血漿circRNA標(biāo)志物序列如SEQ ID NO：1所示。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)血漿中存在hsa_circ_000613以及其對(duì)于胃癌診斷的價(jià)值。提供的血漿circRNA提取方法和試劑盒，能夠從血液樣本中方便、準(zhǔn)確地提取和檢測血漿circRNA，有利于實(shí)驗(yàn)室及臨床血漿circRNA的研究和應(yīng)用。本發(fā)明提供的hsa_circ_000613檢測方法和試劑盒，可以用于快速檢測hsa_circ_000613在內(nèi)的多種circRNA。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物及分子診斷技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種血漿circRNA標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

胃癌是具有高發(fā)生率和死亡率的惡性腫瘤。由于起病隱匿，早期無特征性的臨床癥狀，大多數(shù)病人確診時(shí)已是中晚期，預(yù)后較差。因此實(shí)現(xiàn)胃癌早期診斷對(duì)提高病患生存率尤為重要。目前組織活檢是胃癌的確診金標(biāo)準(zhǔn)，具有明顯創(chuàng)傷性和滯后性，治療上以手術(shù)切除和放化療為主，具有局限性及藥物副作用。因此，急需開發(fā)一種方便、微創(chuàng)、靈敏和特異的診斷方法用于胃癌診斷尤其是早期診斷。

血漿是臨床檢驗(yàn)中的重要樣本之一，因其與所有組織器官都有接觸，能攜帶有關(guān)機(jī)體的大量實(shí)時(shí)有效信息，且采樣方式簡單、樣本易獲取，可通過檢測血漿攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)等分子診斷和監(jiān)測多種疾病。circRNA是一種具有共價(jià)閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)的新型非編碼RNA。由于其種類和數(shù)量豐富、穩(wěn)定性和保守性高、在各種組織細(xì)胞和人體體液中廣泛分布、具有疾病特異性以及組織和發(fā)展階段特異性，參與腫瘤的增殖、凋亡、遷移和侵襲等多種生理和病理過程的生物調(diào)控，是具前景的新型腫瘤分子標(biāo)志物。有研究顯示血漿中circRNA穩(wěn)定且豐富，但血漿circRNA能否作為胃癌診斷標(biāo)志物以及如何建立成熟檢測方法尚不清楚。

通過上述分析，現(xiàn)有技術(shù)存在的問題及缺陷為：

(1)目前針對(duì)胃癌血漿circRNA標(biāo)志物的分析報(bào)道較少，大多對(duì)胃癌組織中circRNA表達(dá)水平進(jìn)行分析，血漿circRNA是否可作為胃癌診斷標(biāo)志物尚不清楚。

(2)對(duì)于血漿circRNA的提取和檢測方法目前較為單一，大多利用trizol LS法聯(lián)合RT-qPCR進(jìn)行提取和檢測，該方法應(yīng)用于血漿circRNA提取難以保證其濃度、純度和操作簡便性。

解決以上問題及缺陷的難度為：目前，急需開發(fā)針對(duì)胃癌診斷的血漿circRNA，以及簡便的提取和檢測血漿circRNA方法，既能保證提取的濃度和純度較好，又能保證檢測的準(zhǔn)確性。

解決以上問題及缺陷的意義為：能為胃癌診斷提供新的潛在血漿circRNA標(biāo)志物和臨床實(shí)驗(yàn)室檢測方法，也能為發(fā)掘和分析更多血漿circRNA應(yīng)用于腫瘤標(biāo)志物提供幫助。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明提供了一種血漿circRNA標(biāo)志物及其應(yīng)用。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種血漿circRNA標(biāo)志物，所述血漿circRNA標(biāo)志物為hsa_circ_000613，所述血漿circRNA標(biāo)志物序列如SEQ ID NO：1所示。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種所述血漿circRNA標(biāo)志物作為胃癌檢測的標(biāo)志物的應(yīng)用。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種所述血漿circRNA標(biāo)志物在制備用于檢測胃癌的芯片、制劑或試劑盒中的應(yīng)用。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種包括含所述血漿circRNA標(biāo)志物的芯片、制劑或試劑盒。

進(jìn)一步，所述試劑盒為胃癌檢測試劑盒，所述試劑盒可測定血漿hsa_circ_000613含量。

進(jìn)一步，所述試劑盒包含檢測hsa_circ_000613含量的PCR引物，引物序列如SEQID NO：2和SEQ ID NO：3所示。