[發(fā)明專利]天然除草劑thaxtomins的高產(chǎn)菌株及其制備方法和用途有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011482864.3 | 申請日: | 2020-12-16 |
| 公開(公告)號: | CN112501101B | 公開(公告)日: | 2022-10-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 牛國清;黃鵬舉;孔德坤;王霞;王美燕;霍清雯 | 申請(專利權(quán))人: | 西南大學(xué) |
| 主分類號: | C12N1/21 | 分類號: | C12N1/21;C12N15/53;C12N15/52;C12N15/65;C12N15/76;C12P17/16;C12R1/47 |
| 代理公司: | 廈門市精誠新創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 35218 | 代理人: | 秦華 |
| 地址: | 400715*** | 國省代碼: | 重慶;50 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 天然 除草劑 thaxtomins 高產(chǎn) 菌株 及其 制備 方法 用途 | ||
1.一株天然除草劑thaxtomins的高產(chǎn)菌株,其特征在于,該菌株來源于
2.如權(quán)利要求1所述天然除草劑thaxtomins的高產(chǎn)菌株,其特征在于,所述thaxtomin基因簇來源為瘡痂鏈霉菌ATCC 49173。
3.如權(quán)利要求1所述天然除草劑thaxtomins的高產(chǎn)菌株,其特征在于,所述txtR的基因序列如SEQ ID NO:39所示。
4.如權(quán)利要求3所述天然除草劑thaxtomins的高產(chǎn)菌株,其特征在于,制備方法為,
thaxtomin基因簇的制備:PCR分別擴增得到SEQ ID NO:11-15所示的五個片段,通過酶切連接將其拼裝成完整的thaxtomin基因簇,再通過λ-RED介導(dǎo)的同源重組將基因簇轉(zhuǎn)換到鏈霉菌整合載體上,獲得帶有thaxtomin基因簇的重組質(zhì)粒A;
Thaxtomin生物合成基因簇的制備:將SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38,與線性化的pBluescript II KS(-)載體同源重組,得到含有SEQ ID NO:36,39,37和 38片段的重組載體B;然后將重組載體B上的SEQ ID NO:36,39,37和 38片段通過內(nèi)切酶切下,再通過λ-RED介導(dǎo)的同源重組系統(tǒng),將SEQ ID NO:36,39,37和 38片段與重組質(zhì)粒A進行同源重組,獲得帶有thaxtomin生物合成基因簇的重組質(zhì)粒C;
菌株的篩選:將重組質(zhì)粒C通過鏈霉菌-大腸桿菌穿梭系統(tǒng)接合轉(zhuǎn)移至突變菌株J1074ΔcebR中,通過安普霉素篩選突變株,最終獲得thaxtomin的高產(chǎn)菌株。
5.權(quán)利要求1-4任一所述天然除草劑thaxtomins的高產(chǎn)菌株用于制備thaxtomins的用途。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息,商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于西南大學(xué),未經(jīng)西南大學(xué)許可,擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作,請聯(lián)系【客服】
本文鏈接:http://www.szxzyx.cn/pat/books/202011482864.3/1.html,轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。





