[發(fā)明專利]一種高密度脂蛋白3的測定試劑、方法和試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011482221.9
• 申請日: 2020-12-16
• 公開（公告）號: CN112695071B
• 公開（公告）日: 2022-12-30
• 發(fā)明（設計）人: 王賢理;池萬余;王伊琳;苗準;鄧慰;盧強
• 申請（專利權）人: 浙江伊利康生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/60
• 分類號: C12Q1/60;C12Q1/30;C12Q1/28;C12Q1/26;C12Q1/44;G01N21/31
• 代理公司: 蘇州國誠專利代理有限公司 32293
• 代理人: 王麗

1.一種高密度脂蛋白3的非疾病診斷目的的測定方法，其特征在于：所述測定方法采用包括以下組分及含量的高密度脂蛋白3的測定試劑：

第一試劑：

將MOPS緩沖液、硫酸鎂、氯化鈉、EDTA、BSA、TOOS、聚乙二醇6000、Eumlgen LS-114、二甲基-β-環(huán)糊精加入水中，攪拌至完全溶解，調節(jié)pH至6.50-7.50，然后加入抗載脂蛋白B 抗體、膽固醇氧化酶和過氧化氫酶，并達到下列濃度：35mM MOPS緩沖液，15mM硫酸鎂， 0.20％Emulgen LS-114，0.07％二甲基-β-環(huán)糊精，2.5g/L聚乙二醇6000 ，3.0g/L抗載脂蛋白B抗體，3.5KU/L膽固醇氧化酶，1.0MU/L過氧化氫酶，51mM氯化鈉， 0.02％Proclin-300，0.2mMEDTA，和5.0g/L BSA，所述百分比為質量百分比；

第二試劑：

將MOPS緩沖液、4-氨基安替比林、牛血清白蛋白、疊氮鈉和Eumlgen B66和Emulgen A90加入水中，攪拌至完全溶解，調節(jié)pH至6.50-7.50，然后加入膽固醇脂酶、過氧化物酶 入水中混合，并達到下列濃度：過氧化物酶 6.5KU/L，膽固醇脂酶 3.5KU/L，4-氨基安替比林0.8g/L，Eumlgen B66 20g/L，Emulgen A90 1g/L，MOPS 50mM，牛血清白蛋白 5g/L，疊氮鈉0.3%（w/w）;

所述測定方法包括以下步驟：

(1) 將樣品與上述第一試劑混合反應，得反應液1；樣品與第一試劑的體積比為1:75；

(2) 將步驟(1)所得的反應液1與上述第二試劑混合反應，得反應液2；反應液1與第二試劑的體積比為3:1；

(3)讀取步驟(2)所得的反應液2在600nm和800nm波長處的吸光度值，計算高密度脂蛋白3的含量。

2.一種高密度脂蛋白3的非疾病診斷目的的測定方法，其特征在于：所述測定方法采用包括以下組分及含量的高密度脂蛋白3的測定試劑：

第一試劑：

將MOPS緩沖液、硫酸鎂、氯化鈉、EDTA、BSA、TOOS、硫酸葡聚糖鈉鹽50、Emulgen 109P、α-環(huán)糊精硫酸鹽、抗載脂蛋白B抗體、Proclin-300加入水中，攪拌至完全溶解，調節(jié) pH至6.50-7.50，然后加入膽固醇氧化酶和過氧化氫酶，并達到下列濃度：70mM MOPS緩沖液，20mM硫酸鎂，0.05％α-環(huán)糊精硫酸鹽，0.30％Emulgen 109P，3.0g/L硫酸葡聚糖鈉鹽50，2.50g/L抗載脂蛋白B抗體，3.5KU/L膽固醇氧化酶，2MU/L過氧化氫酶，100mM氯化鈉，0.2mMEDTA，和5.0g/L BSA，所述百分比為質量百分比；

第二試劑：

將MOPS緩沖液、4-氨基安替比林、BSA、疊氮鈉、TritonX-100和Pluronic L23加入水中，攪拌至完全溶解，調節(jié)pH至6.50-7.50，然后加入膽固醇脂酶、過氧化物酶至溶液中溶解，并達到下列濃度：膽固醇脂酶 5.0KU/L，過氧化物酶 15KU/L， 4-氨基安替比林 0.5g/L，Triton X-100 0. 3%(w/w)，Pluronic L23 0.03%(w/w)，MOPS 90mM，BSA 5.0g/L，疊氮鈉0.1%（w/w）；

所述測定方法包括以下步驟：

(1) 將樣品與上述第一試劑混合反應，得反應液1；樣品與第一試劑的體積比為1:75；

(2) 將步驟(1)所得的反應液1與上述第二試劑混合反應，得反應液2；反應液1與第二試劑的體積比為3:1；

(3)讀取步驟(2)所得的反應液2在600nm和800nm波長處的吸光度值，計算高密度脂蛋白3的含量。