[發明專利]一種生物酶法制備新橙皮苷二氫查爾酮的方法

在審

• 申請號: 202011478840.0
• 申請日: 2020-12-14
• 公開（公告）號: CN114621991A
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發明（設計）人: 陳久福;覃蒙珍;唐婷;宋云飛;李杰
• 申請（專利權）人: 桂林萊茵生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12P19/44
• 分類號: C12P19/44;C07H15/203;C07H1/06
• 代理公司: 廣州海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 張栩顏;馬赟齋

本發明公開了一種生物酶法制備新橙皮苷二氫查爾酮的方法，包括以下步驟：(1)選取新橙皮苷，加入堿性溶液，調節好反應溫度進行反應，反應完全后加酸調節pH值，降溫析出新橙皮苷查爾酮；(2)將新橙皮苷查爾酮溶于醇溶劑中，并采用磷酸鹽緩沖溶液調節好pH，然后加入烯還原酶、輔酶和輔酶再生系統進行反應；(3)反應結束后過濾，將濾液濃縮析晶，再經后處理，即制得新橙皮苷二氫查爾酮。該方法采用烯還原酶代替金屬催化劑，避免了化學試劑使用，還使用輔酶再生系統以減少昂貴輔酶的使用，安全、環保，成本低，且收率高。

技術領域

本發明屬于新橙皮苷二氫查爾酮技術領域，具體涉及一種生物酶法制備新橙皮苷二氫查爾酮的方法。

背景技術

公開號為CN103804439A的申請公開了一種新橙皮苷二氫查爾酮的合成方法，該方法利用新橙皮苷在堿性溶液氫氣環境下，氫化反應制備新橙皮苷二氫查耳酮。

公開號為CN104193786A的申請公開了一種新橙皮苷二氫查爾酮的合成方法，該方法是以新橙皮苷為起始原料，甲醇、乙醇作反應介質，硼氫化鈉、硼氫化鉀作還原劑，加熱條件下，反應制備新橙皮苷二氫查爾酮。該方法雖然簡單，但是，硼氫化鈉、硼氫化鉀用量較大，其還原的選擇性較差，易發生副反應

CN103334119A公開了一種新橙皮苷二氫查爾酮合成方法，該方法先將新橙皮苷溶于堿，得到新橙皮苷查爾酮，再通過電解的方法，將電解液和新橙皮苷查爾酮加入陽極室和陰極室，進行電解，得到新橙皮苷二氫查爾酮。該方法雖然不需使用催化劑和氣體氫氣，通過電解水提供活潑氫達到加氫的目的。但是，也存在不足之處：收率低，需要消耗大量的電能。

現有的制備方法中，新橙皮苷二氫查爾酮生產過程中使用氫氣，需要特殊的氫化反應釜，生產操作危險性較大，其他不使用氫氣的生產方法收率低，而且大多數制備方法中采用了金屬催化劑，不環保。

發明內容

本發明的目的在于提供一種生物酶法制備新橙皮苷二氫查爾酮的方法，該方法采用烯還原酶代替金屬催化劑，避免了化學試劑使用，還使用輔酶再生系統以減少昂貴輔酶的使用，安全、環保，成本低，且收率高。

本發明的上述目的可以通過以下技術方案來實現：一種生物酶法制備新橙皮苷二氫查爾酮的方法，包括以下步驟：

(1)選取新橙皮苷，加入堿性溶液，調節好反應溫度進行反應，反應完全后加酸調節pH值，降溫析出新橙皮苷查爾酮；

(2)將新橙皮苷查爾酮溶于醇溶劑中，并采用磷酸鹽緩沖溶液調節好pH，然后加入烯還原酶、輔酶和輔酶再生系統進行反應；

(3)反應結束后過濾，將濾液濃縮析晶，再經后處理，即制得新橙皮苷二氫查爾酮。

在上述生物酶法制備新橙皮苷二氫查爾酮的方法中：

優選的，步驟(1)中所述新橙皮苷和所述堿性溶液的質量份配比為1：3～10，其中所述堿性溶液的質量百分含量為5～20％。

優選的，步驟(1)中所述堿性溶液為氫氧化鈉溶液或氫氧化鉀溶液。

優選的，步驟(1)中反應溫度為20℃～50℃，反應時間為4～20小時。

更佳的，步驟(1)中反應溫度為30℃～40℃，反應時間為6～8小時。

優選的，步驟(1)中加酸調節pH值為3～4。

優選的，酸包括但不限于鹽酸。

優選的，步驟(2)中所述醇溶劑為甲醇或乙醇，其與新橙皮苷查爾酮的用量關系為5～10mL：1g。

優選的，步驟(2)中所述磷酸鹽緩沖液的濃度為50～100mmol/L，其與新橙皮苷查爾酮的用量關系為10～20mL：1g。

優選的，步驟(2)中調節好pH為5～9。