[發明專利]一種利用肌酐處理特氏杜氏藻生產類胡蘿卜素的方法

有效

• 申請號: 202011472108.2
• 申請日: 2020-12-15
• 公開（公告）號: CN112501234B
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發明（設計）人: 姜建國;吳芳純;梁明華;李瑜;何羽婧;陳浩宏;梁志聰
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12P23/00
• 分類號: C12P23/00;C12N1/12;C12N1/38;C12R1/89
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

1.一種利用肌酐處理特氏杜氏藻生產類胡蘿卜素的方法，其特征在于：

將特氏杜氏藻細胞接種至培養基中，培養，待OD₆₃₀達到0.7～1.1，加入肌酐至終濃度為600μg/mL，于6000Lux光照條件下繼續培養20～24天，提取色素，獲得目標產物；

所述的類胡蘿卜素的組成為如下情況之一：

1）由葉黃素、玉米黃素、α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素組成的總類胡蘿卜素；

2）葉黃素、α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素中的至少一種；

所述的特氏杜氏藻為特氏杜氏藻Dunaliella tertiolecta FACHB-821。

2.根據權利要求1所述的利用肌酐處理特氏杜氏藻生產類胡蘿卜素的方法，其特征在于：

所述的特氏杜氏藻細胞的接種量按體積比5%計。

3.根據權利要求1所述的利用肌酐處理特氏杜氏藻生產類胡蘿卜素的方法，其特征在于：

所述的繼續培養的條件為：光暗周期為14h/10h，溫度為28～33℃，以50r/min的轉速震蕩培養。

4.根據權利要求1所述的利用肌酐處理特氏杜氏藻生產類胡蘿卜素的方法，其特征在于：

所述的提取色素的具體操作為：取培養液，8000 rpm離心1 min，棄去上清液，按體積比10:1加入丙酮，渦旋2 min，浸提20 min，以10000 rpm離心10 min，取上清液轉移至新的離心管中，按體積比100:1加入60%KOH，靜置分層，用0.45 μm的濾膜過濾。

5.根據權利要求1所述的利用肌酐處理特氏杜氏藻生產類胡蘿卜素的方法，其特征在于：

所述的培養基，其成分為：NaNO₃0.420g/L，NaCl87.69g/L，NaH₂PO₄?2H₂O0.156g/L，NaHCO₃0.840g/L，KCl0.074g/L，MgSO₄?7H₂O1.230g/L，CaCl₂?2H₂O0.044g/L，0.1% Fe-EDTA液0.5mL/L，A5微量元素溶液 1mL/L；

所述的A5微量元素溶液，其成分為：H₃BO₃ 2.86g/L，MnCl₂?4H₂O 1.81 g/L，ZnSO₄?7H₂O0.22 g/L，CuSO₄?5H₂O 0.08 g/L，(NH₄)₆Mo₇O₂₄?4H₂O 0.04 g/L；

所述的Fe-EDTA液，其成分為：Na₂EDTA 0.189 g/L，FeCl₃?6H₂O 0.244 g/L。

6.根據權利要求1所述的利用肌酐處理特氏杜氏藻生產類胡蘿卜素的方法，其特征在于：

所述的培養基在使用前，需經滅菌處理，冷卻至室溫待用。

7.根據權利要求6所述的利用肌酐處理特氏杜氏藻生產類胡蘿卜素的方法，其特征在于：

所述的滅菌處理的條件為在102.9 kPa大氣壓下121℃高溫滅菌20min。

8.根據權利要求1所述的利用肌酐處理特氏杜氏藻生產類胡蘿卜素的方法，其特征在于：

所述的培養為培養至OD₆₃₀達到1.0；

所述的繼續培養的時間為24天。