[發(fā)明專利]一種抗CD24的抗體與二乙胺偶氮鎓二醇鹽分子的定點(diǎn)偶聯(lián)物及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011471079.8
• 申請日: 2020-12-14
• 公開（公告）號(hào): CN112592406B
• 公開（公告）日: 2023-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張娟;黃張建;郭敏姬;黃林華
• 申請（專利權(quán)）人: 中國藥科大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K16/28
• 分類號(hào): C07K16/28;C07K1/107;C07K1/34;A61K47/68;A61P35/00
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 唐循文

本發(fā)明屬于生物工程領(lǐng)域，具體涉及一種抗CD24的抗體與二乙胺偶氮鎓二醇鹽分子的定點(diǎn)偶聯(lián)物及其應(yīng)用，由帶有定點(diǎn)活性半胱氨酸的嵌合抗體TG7和一氧化氮供體二乙胺偶氮鎓二醇鹽分子通過馬來酰亞胺?雙硫鍵Linker偶聯(lián)而成。其利用TG7抗體的CD24抗原靶向作用將二乙胺偶氮鎓二醇鹽分子富集到CD24陽性腫瘤細(xì)胞表面并以抗原抗體復(fù)合物的形式內(nèi)化到細(xì)胞內(nèi)部，提高了該一氧化氮供體分子的治療指數(shù)，避免了其單獨(dú)使用時(shí)的非靶向性所造成的對(duì)正常組織細(xì)胞的毒副作用，解決了一氧化氮供體的靶向遞釋問題，為結(jié)直腸癌的治療提供了新的選擇，同時(shí)也可推廣到其他CD24分子過表達(dá)的惡性腫瘤治療中。

背景技術(shù)

目前在世界范圍內(nèi)，惡性腫瘤的發(fā)病率與死亡率都呈現(xiàn)顯著的上升趨勢。具體到結(jié)直腸癌，按照世界衛(wèi)生組織2018年的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，其發(fā)病率位居第三位，死亡率位居第二位。臨床在用的結(jié)直腸癌治療藥物，主要分為化療藥物和生物靶向藥物。化療藥物直接依靠具有高毒性的化藥小分子殺傷結(jié)直腸癌細(xì)胞，如5-FU/LV、伊立替康、奧沙利鉑、卡培他濱等。而生物靶向藥物是通過特異性靶向于結(jié)直腸癌細(xì)胞表面膜受體而阻斷腫瘤相關(guān)信號(hào)通路。這兩類藥物是都是單方面發(fā)揮作用，即使將兩者聯(lián)合給藥也很難發(fā)揮互補(bǔ)的效果，如貝伐單抗和西妥昔單抗。因此，開發(fā)出一種可以將這兩類藥物的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來的抗體小分子藥物偶聯(lián)物(Antibody?drug?conjugate,ADC)或許可以產(chǎn)生增效減毒的雙重效果。

抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)介紹

抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)是一類極具開發(fā)前景的大分子抗體蛋白與小分子化藥的偶聯(lián)形式。在腫瘤化學(xué)治療進(jìn)展緩慢的20年，抗體的廣泛應(yīng)用帶來了一場腫瘤精準(zhǔn)治療的革命。理論上，但凡對(duì)腫瘤細(xì)胞表面抗原有特異性結(jié)合能力的抗體都有可能開發(fā)成有效的靶向藥物，然而很多未被修飾的抗體徒有靶向能力而缺乏治療活性。而許多小分子化藥在體外抑瘤實(shí)驗(yàn)中往往表現(xiàn)出極好的抑瘤效果，但一旦進(jìn)行到體內(nèi)抗腫瘤研究階段就會(huì)展現(xiàn)出很強(qiáng)的毒副作用，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也使得正常細(xì)胞和組織的活性嚴(yán)重受影響，即“殺敵一千，自損八百”。抗體-藥物偶聯(lián)物(Antibody?drug?conjugate,ADC)以抗體蛋白作為運(yùn)送小分子藥物的“導(dǎo)彈”，而以具有高細(xì)胞毒性的小分子藥物為“彈頭”，充分發(fā)揮了這兩個(gè)組成部分各自的優(yōu)點(diǎn)。

ADC藥物發(fā)揮功效依賴于以下四個(gè)關(guān)鍵因素——靶點(diǎn)(腫瘤抗原)、抗體、連接子(Linker)、彈頭(毒素分子)。腫瘤抗原要求在腫瘤組織中過表達(dá)，而在正常組織上少表達(dá)或不表達(dá)。抗體應(yīng)對(duì)腫瘤抗原有較高親和力，有較好的藥代動(dòng)力學(xué)特性，且與抗原結(jié)合后可以內(nèi)化到腫瘤細(xì)胞。ADC藥物的連接子(Linker)主要分為裂解型和非裂解型兩種。裂解型Linker主要分為酶裂解型、酸裂解型和還原條件裂解型。而彈頭主要是一些具有高細(xì)胞毒性的化藥小分子，如海兔毒素類、奧瑞他汀類和美登素類微管蛋白抑制劑，以及刺孢霉素類、倍癌霉素類及安曲霉素類DNA損傷劑。

盡管經(jīng)過了幾十年的發(fā)展，全球目前也只有不到10個(gè)ADC產(chǎn)品獲批，但基于ADC是一種高度靶向的精準(zhǔn)癌癥療法，依舊吸引著許多科學(xué)家們的關(guān)注，他們嘗試不同方面優(yōu)化抗體偶聯(lián)物相關(guān)技術(shù)，使得曾經(jīng)為藥物開發(fā)死胡同的ADC現(xiàn)已演變成一個(gè)競爭激烈的領(lǐng)域。2020年2月由科睿唯安發(fā)布的《2020最值得關(guān)注的藥物預(yù)測》年度報(bào)告中，入選重磅炸彈藥物的3款腫瘤藥中有兩款為抗體偶聯(lián)藥物，分別為Enhertu和Sacituzumab?govitecan，這無疑給抗體偶聯(lián)藥物的研究者們帶來更強(qiáng)的信心，也進(jìn)一步說明抗體偶聯(lián)藥物具有強(qiáng)大的發(fā)展?jié)摼啊?/p>

因ADC藥物設(shè)計(jì)理念及其結(jié)構(gòu)的特殊性，其技術(shù)壁壘比一般生物藥都要高，首先既要保證較高的靶點(diǎn)內(nèi)吞率而使得ADC通過抗體與抗原結(jié)合后能內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞并在胞內(nèi)特異性釋放小分子，降低脫靶毒性；也要通過特定化學(xué)合成方法使linker有合適的化學(xué)鍵能完成與抗體連接，并且在腫瘤內(nèi)部斷裂釋放毒素小分子而在其他環(huán)境保持穩(wěn)定，即ADC藥物具有較高的穩(wěn)定性、均一性和可控性，而特異性位點(diǎn)偶聯(lián)技術(shù)的出現(xiàn)可以解決這一問題，其可使小分子偶聯(lián)在抗體特定部位，從而得到偶聯(lián)比均一的ADC藥物，提高ADC在體內(nèi)的藥物代謝的可控性。