[發明專利]一種抗菌肽化合物及抗菌肽提取物及其制備方法和用途有效
| 申請號： | 202011468386.0 | 申請日： | 2020-12-14 |
| 公開（公告）號： | CN112661814B | 公開（公告）日： | 2022-07-19 |
| 發明（設計）人： | 李麗紅;任風芝;張雪霞;郄麗萍;段銀簫;朱京童;封玉彬;王哲;米文強;孔德清 | 申請（專利權）人： | 華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司 |
| 主分類號： | C07K7/08 | 分類號： | C07K7/08;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/16;A23K20/147;A23L3/3526;A61K38/10;A61P31/04;A61P31/10;A61K8/64;A61Q19/00;A61Q17/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 052165 河北省*** | 國省代碼： | 河北;13 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 抗菌 化合物 提取物 及其 制備 方法 用途 | ||
1.一種抗菌肽化合物A，其特征在于：所述抗菌肽化合物A，如式（I）所示，該抗菌肽化合物A來源于保藏編號為CGMCC No .16337的側孢短芽孢桿菌（Brevibacilluslaterosporus），分子量為1556Da，所述抗菌肽化合物A序列為 Leu-Val-Dhb-Orn-Val-Val-Val-Lys-Val-Leu-Lys-Tyr-Leu-Thr-ol，
式(I)。
2.一種抗菌肽提取物，其特征在于，以權利要求1所述抗菌肽化合物A為主要成分，其他成分為所述抗菌肽化合物A的類似物，分子量在1542-1602Da之間，其制備方法包括下述步驟：
1）取保藏編號為CGMCC No.16337的側孢短芽孢桿菌的發酵液，其中發酵培養基配方：葡萄糖 20-50g、甘油5-20g 、無機銨鹽2-5g、磷酸氫二鉀0.05-0.5g、酵母粉或玉米漿粉3-10g、工業蛋白胨5-15g、氯化鈉5-10 g 、氯化鈣1-3g 、纈氨酸 1-4g，水1000ml，pH 6.0-7.0；發酵時間為12-25小時，調pH至2.5-3.5，加入助濾劑過濾得到抗菌肽濾液；
2）將抗菌肽濾液調pH至5.5-6.5，將濾液通過大孔樹脂吸附，再以解析劑進行解析，得到抗菌肽解析液；
3）將解析液經過脫色樹脂柱脫色，得到脫色液；
4）將脫色液濃縮至小體積，調溶液pH至2.5-3.5，加入沉淀劑，過濾，取沉淀物，加溶劑溶解，過濾得到溶解液；
5）將溶解液濃縮得到抗菌肽提取物；
其中步驟2）中所述的大孔樹脂為XR925CS、XR925J、D312、HD-2樹脂中的任意一種；其中步驟2）中所述的解析劑為70-80%乙醇或70-80%丙酮的水溶液；其中步驟3）中所述的脫色樹脂為XRTS-3、TS-4、D315、D304中的任意一種；其中步驟4）中所述沉淀劑為氯化鈣、氯化鈉、硫酸鈉、硫酸銨、硫酸鎂中的任意一種，用量為溶液體積的5%-15%，為質量體積比；其中步驟4）中所述的溶劑為70-80%乙醇、70-80%丙酮或70-80%甲醇的水溶液。
3.權利要求1所述抗菌肽化合物A的制備方法，其特征在于包括下述步驟：
1）取側孢短芽孢桿菌CGMCC No.16337發酵液，其中發酵培養基配方：葡萄糖 20-50g、甘油5-20g 、無機銨鹽2-5g、磷酸氫二鉀0.05-0.5g、酵母粉或玉米漿粉3-10g、工業蛋白胨5-15g、氯化鈉5-10 g 、氯化鈣1-3g 、纈氨酸 1-4g，水1000ml，pH 6.0-7.0；發酵時間為12-25小時，調pH至2.5-3.5，加入助濾劑過濾得到抗菌肽濾液；
2）將抗菌肽濾液調pH至5.5-6.5，將濾液通過大孔樹脂吸附，再以解析劑進行解析，得到抗菌肽解析液；
3）將解析液經過脫色樹脂柱脫色，得到脫色液；
4）將脫色液濃縮至小體積，調溶液pH至2.5-3.5，加入沉淀劑，過濾，取沉淀物，加溶劑溶解，過濾得到溶解液；
5）將溶解液濃縮得到抗菌肽提取物，再經ODS制備色譜，25%-35%的0 .5‰-1‰三氟乙酸—乙腈水溶液梯度洗脫，液相檢測，收集出峰時間在12.5min的色譜峰洗脫液，濃縮干燥，得到抗菌肽化合物A；
其中步驟2）中所述的大孔樹脂為XR925CS、XR925J、D312、HD-2樹脂中的任意一種；其中步驟2）中所述的解析劑為70-80%乙醇或70-80%丙酮的水溶液；其中步驟3）中所述的脫色樹脂為XRTS-3、TS-4、D315、D304中的任意一種；其中步驟4）中所述沉淀劑為氯化鈣、氯化鈉、硫酸鈉、硫酸銨、硫酸鎂中的任意一種，用量為溶液體積的5%-15%，為質量體積比；其中步驟4）中所述的溶劑為70-80%乙醇、70-80%丙酮或70-80%甲醇的水溶液。
4.權利要求1所述抗菌肽化合物A或權利要求2所述抗菌肽提取物在制備用于預防和/或治療細菌和/或真菌感染的藥物中的應用。
5.權利要求1所述抗菌肽化合物A或權利要求2所述抗菌肽提取物在制備具有抑菌和/或殺菌性能的產品中的應用。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司，未經華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202011468386.0/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
