[發明專利]一株枯草芽孢桿菌株B13及其應用

在審

• 申請號: 202011463926.6
• 申請日: 2020-12-14
• 公開（公告）號: CN112980715A
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發明（設計）人: 劉占英;胡建華;李永麗
• 申請（專利權）人: 內蒙古工業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P25/00;C12R1/125
• 代理公司: 武漢知產時代知識產權代理有限公司 42238
• 代理人: 張毅

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一株枯草芽孢桿菌株B13及其應用。一株枯草芽孢桿菌株B13(Bacillus subtilis 13)，保藏編號為CCTCC M 2020854，于2020年12月4日保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC)。本發明所述枯草芽孢桿菌株B13，該菌株在經過重離子誘變后，核黃素搖瓶發酵產量顯著提高，可作為企業工業化生產菌株，滿足市場對核黃素的需求。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一株枯草芽孢桿菌株B13及其應用。

背景技術

核黃素又名維生素B2，是一種水溶性維生素，這種黃色晶體最早從乳清當中分離，因分子結構中含有核糖醇而被命名為核黃素，核黃素屬于B族維生素家族，參與細胞的氧化還原和新陳代謝，與核酸、蛋白質以及脂肪的代謝有關，在哺乳動物生長發育過程中起著重要的作用，在飼料行業、食品醫藥行業中都有著廣泛的應用。

核黃素的生產方式主要分為化學合成法、化學半合成法與微生物發酵法三種，目前，應用最廣且已工業化生產的主要為微生物發酵法，于其他方法相比，具有來源廣泛、條件溫和、產物天然、生物活性好、無毒物殘留等優點。微生物生產方式效率高，主要生產菌種為芽孢桿菌，對菌種的選育及改造成為研究的重點近些年，我國科學家通過菌株選育、發酵工程優化相結合的手段，使核黃素發酵產量有所提高，但仍不能滿足市場的需求。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了枯草芽孢桿菌株B13及其應用。

本發明提供一株枯草芽孢桿菌株B13(Bacillus subtilis 13)，保藏編號為CCTCC M 2020854，于2020年12月4日保藏于中國典型培養物保藏中心 (CCTCC)。保藏單位地址：中國武漢武漢大學。

進一步地，所述枯草芽孢桿菌株B13由出發菌株以12C6+離子束在輻照速率30Gy/min的條件下誘變得到，其中，出發菌株為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)，輻照劑量為0～300Gy。

上述枯草芽孢桿菌株B13在產核黃素上的應用。

一種生物菌劑，所述生物菌劑由上述枯草芽孢桿菌株B13制得。

進一步地，所述生物菌劑為液體菌劑，且所述生物菌劑中所述枯草芽孢桿菌株B13的濃度為10⁶個/mL。

上述生物菌劑在產核黃素上的應用。

一種生產核黃素的方法，其具體包括以下步驟：

S1、制備發酵培養基；

S2、將枯草芽孢桿菌B13接種至發酵培養基內，于30～40℃、160～220rpm 條件下，避光發酵培養24-96h后，得到培養物，通過對培養物進行提取，即可得到核黃素。

本發明提供的技術方案帶來的有益效果是：本發明提供了一株枯草芽孢桿菌株B13，該菌株在經過重離子誘變后，核黃素搖瓶發酵產量顯著提高，可作為企業工業化生產菌株，滿足市場對核黃素的需求。

具體實施方式

為使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將對本發明實施方式作進一步地描述。

下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法。

下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為自常規生化試劑商店購買得到的。

以下實施例中的定量試驗，均設置三次重復實驗，結果取平均值。

本發明的實施例提供了一株枯草芽孢桿菌株B13，其由以下方法獲得：

S1、篩選實驗菌株：S11、選取出發菌株，具體的，本發明所選取的出發菌株為產核黃素的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)；