[發明專利]一種負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架的制備和應用

有效

• 申請號: 202011463467.1
• 申請日: 2020-12-11
• 公開（公告）號: CN112675360B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發明（設計）人: 李燕;臧宏運;宋婷
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L27/38;A61L27/52;A61L27/58;A61L27/54;A61L27/60;A61K9/06;A61K47/42;A61L26/00;C12N5/0775
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 張黎

1.一種負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架，其特征在于，所述復合支架以明膠靜電紡絲纖維膜為基底，加入脂肪干細胞懸浮液，待細胞附在明膠靜電紡絲纖維膜后，再加入明膠光交聯溶液，然后經光交聯作用制備成陣列排布圖案化圓柱狀明膠水凝膠，即為負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架；

所述明膠靜電紡絲纖維膜以明膠為原料，采用靜電紡絲設備紡絲得到纖維膜，然后將所得纖維膜置于京尼平-酒精溶液中進行交聯固化制備得到；

所述明膠光交聯溶液為：質量濃度10-30％Type A型明膠PBS溶液、聯吡啶釕PBS溶液、過硫酸鈉PBS溶液和質量濃度為0.05～0.2％胭脂紅PBS溶液，按照體積比為8:1:1:6配置而成。

2.根據權利要求1所述負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架，其特征在于，所述圓柱狀明膠水凝膠的直徑為600-800μm，厚度為300-600μm。

3.根據權利要求1所述負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架，其特征在于，所述脂肪干細胞懸浮液中，細胞的數量為1×10⁴～3×10⁴個。

4.根據權利要求1所述負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架，其特征在于，所述光交聯作用在PDMS模具及掩膜存在下進行，其過程為：將所述明膠靜電紡絲纖維膜置于PDMS模具中，然后加入所述明膠光交聯溶液，蓋上掩膜，并經過光照進行交聯反應，加PBS溶解未交聯的部分，最后再浸泡于京尼平-PBS溶液中進一步固化，清洗后即得所述負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架。

5.根據權利要求4所述負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架，其特征在于，所述光照條件為：光源為冷光源LED白光，光照時間為8～20min，光源距離為7～20cm。

6.一種權利要求1所述負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1.制備明膠靜電紡絲纖維膜：將明膠溶于六氟異丙醇中，制備得到靜電紡絲溶液，然后在室溫、濕度低于50％條件下，經靜電紡絲設備制備，收集紡絲纖維膜，并在京尼平-酒精溶液中進行交聯固化，洗凈后得到明膠靜電紡絲纖維膜；

S2.制備PDMS模具及掩膜：采用PDMS模具產品制備所需形狀的上層模具和下層模具；所述掩膜為PET膜，可按照需要設計其圖案，然后將S1制備好的明膠靜電紡絲纖維膜置于PDMS上層模具中；

S3.負載脂肪干細胞：脂肪干細胞經貼壁培養后，加入細胞胰酶消化，計數離心，加細胞培養基重懸后，滴加到明膠靜電紡絲纖維膜上，靜置；

S4.光交聯作用：配置光交聯溶液，待脂肪干細胞貼附在明膠靜電紡絲纖維膜上后，加入光交聯溶液，靜置，然后蓋上掩膜，并經光照進行交聯反應；

S5.待光交聯反應結束后，最后再浸泡于京尼平-PBS溶液中進一步固化，清洗后即得所述負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架。

7.權利要求1至5任一所述負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架在制備創傷敷料中的應用。

8.權利要求1至5任一所述負載hADSCs雙層皮膚仿生水凝膠復合支架作為載體，負載藥物中的應用。