[發明專利]一種通過胚拯救獲得紫荊屬種間雜交幼苗的方法

在審

• 申請號: 202011447364.6
• 申請日: 2020-12-09
• 公開（公告）號: CN112586351A
• 公開（公告）日: 2021-04-02
• 發明（設計）人: 張林;劉雙枝;王樂平;馮立凱;張文馨;張玉煥;趙嘉欣
• 申請（專利權）人: 鄢陵中林園林工程有限公司;河南四季春園林藝術工程有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 焦作市科彤知識產權代理事務所(普通合伙) 41133
• 代理人: 聶智良

本發明公開了一種通過胚拯救獲得紫荊屬種間雜交幼苗的方法，包括采集紫荊屬種間雜交后的莢果，剝取未成熟種子并進行表面滅菌，分離取得未成熟種子中的幼胚，誘導培養，增殖培養，生根培養等步驟。本發明可以幫助紫荊屬種間雜交種子的胚發育成熟，并進一步形成植株，克服了自然狀態下紫荊屬種間雜交種子發育中、后期的發育障礙，短期內即可獲得大量胚拯救后代；本發明可操作性強，快捷高效，極大地縮短了育種周期，對紫荊屬新品種的培育具有重要意義。

技術領域

本發明涉及生物技術育種領域，特別是涉及一種通過胚拯救獲得紫荊屬種間雜交幼苗的方法。

背景技術

紫荊屬是豆科花卉，約8種。其中我國有5種，分別是紫荊、湖北紫荊、黃山紫荊、垂絲紫荊和廣西紫荊。另外3種分別是主要分布于北美東部的加拿大紫荊、北美西部的西部紫荊，以及歐洲中部和南部的南歐紫荊。紫荊屬植物一般先開花后長葉，花期為3～4月，可四季兼賞，春觀花，夏觀葉，秋觀果，冬觀干，是一種優良的觀賞性園藝樹種。另外，紫荊屬植物抗逆性強，耐寒，耐酷暑，耐旱，抗病蟲害，根系發達，固土能力強，具有廣闊的園林應用前景。

目前，紫荊屬的品種已有近百個，但是尚未培育出種間雜交的品種。這是由于種間雜交后的種子存在敗育現象，在發育中、后期逐漸壞死，自然條件下很難得到發育正常的種子，成為種間雜交育種的瓶頸。

發明內容

本發明的目的就在于克服上述不足，提供一種通過胚拯救獲得紫荊屬種間雜交幼苗的方法，為新品種選育提供大量資紫荊屬種間雜交育種提供獲得雜交幼苗的有效方法，并縮短育種周期。為達到上述目的，本發明是按照以下技術方案實施的：

一種通過胚拯救獲得紫荊屬種間雜交幼苗的方法，包括以下步驟：

S1，6、7月份采集紫荊屬種間雜交后的莢果，剝取未成熟種子并進行表面滅菌；

S2，在無菌條件下，分離取得未成熟種子中的幼胚；

S3，在無菌條件下，將步驟S2獲得的幼胚，接種到誘導培養基上進行培養；培養條件為：溫度22～25℃，光照強度4000Lux，光照周期16h/d；

S4，步驟S3的幼胚長出的幼苗長至10cm時，在無菌條件下，將幼苗從第一片真葉與第二片真葉中間切成上下兩部分，下半部分的根剪成1cm長，上半部分每一腋芽剪成一個莖段，均轉入增殖培養基中培養；培養條件與步驟S3相同，30～45天轉接一次；

S5，將增殖培養基獲得的幼苗剪成4cm以上的莖段，轉接到生根培養基，其余不足4cm的莖段轉接到新的增殖培養基，培養條件與步驟S3相同。

優選的，步驟S1中，未成熟種子表面滅菌的過程如下：首先，自來水下沖洗30min，在超凈工作臺內用75％的乙醇浸泡30s，使用無菌水沖洗2～3遍，每次沖洗的時間為30s；然后用0.1％的升汞溶液浸泡5min，無菌水沖洗3～5遍，每次沖洗的時間為30s；最后用滅過菌的吸水紙吸去種子表面的水分。

優選的，步驟S2中，分離取得未成熟種子中幼胚的過程如下：用解剖刀在未成熟種子的合點端進行橫切，用鑷子將里面的幼胚取出。

優選的，步驟S3中，誘導培養基的成分為MS+6-BA 3.0mg/L+NAA0.05mg/L+GA0.05mg/L+AC 150mg/L，葡萄糖30g/L，瓊脂5.26g/L；pH為5.5～5.8。

優選的，步驟S4中，增殖培養基的成分為MS+KT 1.5mg/L+6-BA 1.5mg/L+NAA0.05mg/L+AC 150mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂5.26g/L；pH為5.5～5.8。

優選的，所述步驟S5中，生根培養基的成分為1/2MS+NAA0.5mg/L+VH0.1mg/L+AC150mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂5.26g/L；pH為5.5～5.8。

本發明的作用原理：