[發(fā)明專利]一種高營養(yǎng)富硒羊奶制備方法及其蛋白特征肽的表征應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011446286.8
• 申請日: 2020-12-11
• 公開（公告）號: CN112595683B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 何書海;范沙小
• 申請（專利權(quán)）人: 暮羊羊生物科技有限公司;平山縣慕青家庭農(nóng)場
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 江蘇長德知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32478
• 代理人: 馮娟

本發(fā)明涉及食品生物檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種高營養(yǎng)富硒羊奶制備方法及其蛋白特征肽的表征應(yīng)用，本發(fā)明提供了一種富硒羊奶的制備方法，通過該方法獲得的富硒羊奶蛋白含量高、硒含量充足，可以作為產(chǎn)品質(zhì)量檢測中的陽性標(biāo)準(zhǔn)品，同時提供一種標(biāo)準(zhǔn)特征肽KHKMEHVSS，實現(xiàn)了αs2?酪蛋白的定量檢測，確定樣品中的羊奶含量，該方法具有較好的線性、靈敏度、回收率和精密度。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食品生物檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種高營養(yǎng)富硒羊奶制備方法及其蛋白特征肽的表征應(yīng)用，所述方法可以應(yīng)用在對富硒羊奶的鑒定和評價中。

背景技術(shù)

羊奶在日常生活中是一種具有很高生物活性的營養(yǎng)來源，并且羊奶的消費量有增加的趨勢，對牛乳過敏的一些嬰幼兒和兒童也可以選擇羊乳。羊乳可以顯著改善胃腸道菌群結(jié)構(gòu)。羊乳中礦物質(zhì)均為可溶的，含有較多礦物質(zhì)，鈣磷比例適宜達到2:1水平，對于預(yù)防中老年人骨組織改變，羊乳是消費者理想的選擇。和牛奶比較，羊奶球蛋白顆粒比較小，質(zhì)量分?jǐn)?shù)很高，因此羊乳相較于其他乳制品更易被人體消化利用。

研究證實，和牛奶相比，羊奶中的乳汁中存在較高量的αs1-酪蛋白和αs2-酪蛋白。其中，αs2-酪蛋白是一個與αs1-酪蛋白不相同的類別，并已從廣泛的物種中鑒定出來。αs2-酪蛋白由于難以分離和純化可能是調(diào)查最少的蛋白質(zhì)。但是，它首先在哺乳動物的奶中被發(fā)現(xiàn)，并且可占全部酪蛋白含量比高達29％。完整的αs2-酪蛋白的氨基酸序列由207個殘基組成，帶有含大量正電的側(cè)鏈，尤其是在C端部分(Stewartetal.1987)。αs2-酪蛋白含量的變化是產(chǎn)生山羊奶酪蛋白獨特的物理化學(xué)特性的因素，這也解釋了山羊奶和牛奶之間有很大一部分差異的特性的原因。

隨著生活水平的提高，富硒羊奶也逐步被大眾所接受和認(rèn)可，并成為商業(yè)化的熱點。例如專利CN106993579A中公開了一種有機富硒羊奶的制備方法，主要是通過利用奶羊食用了大量的富硒草料和富硒飼料從而產(chǎn)生富硒羊奶。專利CN108634000A中公開了一種富硒羊奶粉及其生產(chǎn)方法，主要是通過將普通羊奶粉與富硒谷物粉等混合制備成相應(yīng)的產(chǎn)品。專利CN110558382A中公開了一種富硒奶的生產(chǎn)方法，通過首先培育富硒麥苗，然后將富硒麥苗按量讓奶牛或羊等產(chǎn)奶動物食用，實現(xiàn)產(chǎn)出富硒奶。

但是這些方法中制備獲得的產(chǎn)品由于不同加工工藝等原因造成產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，缺乏相應(yīng)的檢測指標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)有技術(shù)中沒有建立針對羊奶含量、硒含量準(zhǔn)確有效的評價檢測方法。此外，羊奶原料、羊全脂奶粉等原材料成本較高。價格較低、產(chǎn)量較高的奶牛奶粉摻入羊奶粉的摻假現(xiàn)象頻繁出現(xiàn)。因此迫切的需要一種可以特異性判斷羊奶產(chǎn)品，尤其是富硒羊奶產(chǎn)品的方法。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種用于檢測羊奶產(chǎn)品，尤其是富硒羊奶產(chǎn)品的特征肽及其組合。使用該特征肽組合可以準(zhǔn)確檢測樣品中的羊奶含量，尤其是富硒羊奶的含量，具有較高的特異性、靈敏度、回收率和精密度。

其中所述的特征肽選自：KHKMEHVSS；

同時，本申請還提供內(nèi)標(biāo)特征肽，其中所述的內(nèi)標(biāo)特征肽選自：KHKM*EHVSS，其中M*為碳氮全同位素標(biāo)記的蛋氨酸；

進一步的，本發(fā)明提供一種上述蛋白特征肽在富硒羊奶檢測中的應(yīng)用流程，包括如下步驟：

第一步，利用石墨爐原子吸收法測定奶類樣品中的總硒含量；

第二步，利用特征肽確定奶類樣品中的羊奶含量；

第三步，獲得產(chǎn)品分析結(jié)果。

進一步的，本發(fā)明提供上述步驟的具體參數(shù)，其中，

第一步具體為：精確稱取樣品于聚四氟乙烯消化罐中，加入HNO3溶液和H2O2溶液，擰緊外蓋放入微波消化儀，進行微波消解，使用石墨爐原子吸收繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測定樣品中的總硒量。

第二步具體包括如下步驟：