[發明專利]一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法

在審

• 申請號: 202011441731.1
• 申請日: 2020-12-08
• 公開（公告）號: CN112698038A
• 公開（公告）日: 2021-04-23
• 發明（設計）人: 殷奎德;張興梅;韓琰旭;張科;陳發榮;吳月皓;齊瑜
• 申請（專利權）人: 黑龍江八一農墾大學;北京艾旗斯德科技有限公司
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/532;G01N33/531;G01N33/53
• 代理公司: 長沙湘馳達知識產權代理事務所(普通合伙) 43242
• 代理人: 羅若愚

1.一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法，其特征在于包括以下步驟:

S1：制備膠體碳溶液：將糖溶于稀堿溶液中，加入酰胺糖反應10-120min，離心、洗滌、冷凍干燥后得到黑色膠體碳粉末，將膠體碳粉末進行超聲，在堿性條件下用環氧基分子活化，并配置成溶液；

膠體碳金鋼化：將膠體碳溶液，進行金剛化，分散，最后將其稀釋成標準濃度的膠體金剛碳溶液；

S2：取粒徑為40nm的膠體金鋼碳溶液100mL，調至pH=7.2，分別標記抗體得到碳標抗體溶液；

S3：先將碳標抗體溶液離心取黑色上清溶液，進行再離心，離心后溶液分為三層：透明上清液、管底可流動的黑色沉淀及管底壁上黑色致密的碳顆粒層，將可流動的黑色沉淀轉移到另外一個離心管中，用重懸液重懸至原量0.8倍，加入0.1%的疊氮鈉4℃保存備用；

S4：將碳標抗體結合到濾紙或玻璃纖維紙上，并通過處理液進行水化和封閉處理，浸泡30min后于溫度37℃下烘干2小時，得到結合墊；

S5：將步驟S2碳標抗體溶液噴涂在結合墊上：噴涂機將碳標抗體在濾紙或玻璃纖維紙上均勻噴涂，噴樣量在30μL/cm²，37℃真空干燥，得到半成品；

S6：將半成品上涂覆有蘇丹紅I-明膠偶聯物和羊抗兔IgG溶液，形成平行的檢測線和質控線；

S7：將其粘貼在膠板上，制成膠體金剛碳試紙條。

2.根據權利要求1所述的一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法，其特征在于：步驟S2中標記抗體的方法如下：取100mL膠體碳溶液，在磁力攪拌器下混合條件下，加入6μg/mL的單克隆抗體，加入終質量濃度為1%的海藻糖，接著加入終質量濃度為0.5%的兔抗蘇丹紅I-BSA，得到碳標抗體100mL，4℃保存過夜后冷凍超速離心純化。

3.根據權利要求1所述的一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法，其特征在于：步驟S1中膠體碳溶液金剛化方法如下：將膠體碳溶液3個大氣壓的壓力下煮沸30-40min，然后于40-60KHZ下超聲30-40min。

4.根據權利要求1所述的一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法，其特征在于：步驟S1中糖為葡萄糖、蔗糖和果糖的一種或兩種。

5.根據權利要求1所述的一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法，其特征在于：步驟S1的反應條件為溫度170-210℃，壓力為1-1.5MPa。

6.根據權利要求1所述的一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法，其特征在于：步驟S3中離心步驟為：常溫、轉速為1200-1500rpm條件下離心20-30min。

7.根據權利要求1所述的一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法，其特征在于：步驟S3中再離心步驟為：4℃在轉速為8000 r/min條件下離心30min。

8.根據權利要求1所述的一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法，其特征在于：步驟S4中結合墊處理液為：含有終質量濃度為0.3%吐溫-20、2%海藻糖、10%蔗糖及pH值為7.2、濃度為0.01mol/L的PBS溶液。

9.根據權利要求1所述的一種食品中蘇丹紅I膠體金剛碳檢測試紙條的制備方法，其特征在于：步驟S5中，噴涂之前，將所述結合墊浸入pH70-8.4的PBS中2min，取出，經80℃烘干干燥。