[發明專利]一種利用唾液中的蛋白組合物快速檢測人體疲勞的方法

在審

• 申請號: 202011440648.2
• 申請日: 2020-12-08
• 公開（公告）號: CN112730270A
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 許巖麗;尹天露;高曉歡;席愛萍;趙朝賢;丁敏;蘇縣輝;宋永紅
• 申請（專利權）人: 河北工程大學
• 主分類號: G01N21/25
• 分類號: G01N21/25;G01N1/38;G01N30/02;G01N30/06;A61B5/369;G16H50/30
• 代理公司: 石家莊眾志華清知識產權事務所(特殊普通合伙) 13123
• 代理人: 張明月

本發明涉及一種利用唾液中的蛋白組合物快速檢測人體疲勞的方法，屬于人體疲勞檢測技術領域，通過測定唾液中的唾液淀粉酶和免疫球蛋白K的含量確定人體的疲勞狀態；所述唾液淀粉酶和免疫球蛋白K的含量與人體的疲勞狀態為正相關關系。本發明是一種非侵入式的疲勞標志物的檢測方法，利用在人體處于疲勞狀態時具有良好的穩定性、特異性且含量與疲勞程度正相關的蛋白標組合物判定人體是否疲勞以及疲勞的程度，能夠準確、簡單、快捷地測定人體疲勞程度，且不會破壞人體組織，具有無創、無痛的優點，社會意義顯著。

技術領域

本發明涉及一種利用唾液中的蛋白組合物快速檢測人體疲勞的方法，屬于人體疲勞檢測技術領域。

背景技術

在現代化工作強度、精密度、獨立作業程度越來越高、車輛急速增加的當今社會，存在著易使職業人員過度疲勞的大環境，這種腦力疲勞與體力疲勞相結合的疲勞，區別于亞健康，也區別于由于各種疾病引起的病理性疲勞。WHO對58個國家資料統計表明，無論是發達還是發展中國家意外傷害都是前五位的死因之一，其中疲勞是引發交通意外傷害和職業場所傷害的重要原因。

我國每年因疲勞而死亡的人數多達60萬，導致早亡的壽命損失大于任何一種疾病，這些“不起眼”的疲勞，往往給我們帶來災難性的后果。疲勞造成的直接、間接總體損失和社會代價巨大，目前世界各國對違反交通規則、超速、飲酒等交通事故危險因素都有明確的管理條例和監管措施，但對于其中造成25％-30％交通事故的疲勞這一主要危險因素，全世界至今沒有好的檢測和控制方法。雖然Fukuda等制定了診斷疲勞標準被國際醫學界公認為金標準，以及腦電圖Theta波、心電圖HF及LF/HF的比率變化等，但這些診斷是用于臨床上的疲勞判斷，而且多是有創的血樣采集，都不能用于現場快速準確的疲勞識別；若能參照檢測酒駕的方法建立疲勞的準確、快速識別方法，對有效預防和減少因疲勞導致的生命和安全隱患意義重大。

發明內容

本發明的目的是提供一種利用唾液中的蛋白組合物快速檢測人體疲勞的方法，用于快速、簡便、準確地檢測人體的疲勞程度。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案是：

一種利用唾液中的蛋白組合物快速檢測人體疲勞的方法，通過測定唾液中的唾液淀粉酶和免疫球蛋白K的含量確定人體的疲勞狀態；所述唾液淀粉酶和免疫球蛋白K的含量與人體的疲勞狀態為正相關關系。

本發明技術方案的進一步改進在于：先用比色法檢測唾液稀釋液中的唾液淀粉酶的含量，初步得到人體的疲勞狀態的結論；所述比色法優選光電比色法。再用高通量的液相-質譜聯用方法檢測唾液制備液的免疫球蛋白K的含量，得到人體的疲勞狀態的結論；二者結論一致，最終確定人體的疲勞狀態的結論。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述唾液的收集時受試人要先用生理鹽水漱口三次，再用清水漱口三次，然后收集唾液；所述唾液收集量不少于1mL。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述唾液稀釋液的配制方法為取0.1ml新鮮唾液用磷酸鹽緩沖溶液稀釋100倍。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述唾液制備液的制備方法為將唾液進行離心處理得到上清液，向上清液中滴入蛋白質提取劑后冷凍一段時間，得到冷凍液；將冷凍液進行離心處理，取出下層液并再次冷凍，得到蛋白干粉；將蛋白干粉溶于水化液中，并離心處理，制得唾液制備液。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述磷酸鹽緩沖溶液的pH為6.5～7.5，且其中含8～10mmol/L的磷酸氫二鈉和2～5mmol/L的磷酸二氫鉀。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述新鮮唾液儲存時需加入蛋白酶抑制劑，所述蛋白酶抑制劑為亮肽素、抗痛素、糜蛋白酶抑素、抑彈性蛋白酶醛、抑胃蛋白酶素、磷酰胺素的混合物，儲存溫度為-80～-70℃。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述初步得到的結論與最終得到的結論不一致時，結果無效，重復進行唾液淀粉酶和免疫球蛋白K的含量檢測。