[發明專利]一種促進干細胞生長的培養液及其制作方法

在審

• 申請號: 202011434332.2
• 申請日: 2019-09-20
• 公開（公告）號: CN112626012A
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 成大一;李承根;張濤;徐源
• 申請（專利權）人: 深圳市未來細胞生命科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775
• 代理公司: 北京高航知識產權代理有限公司 11530
• 代理人: 喬浩剛

本發明提出了一種促進干細胞生長的培養液，所述的培養液包括脂肪干細胞﹑白樺茸微粒和培養基，所述的白樺茸微粒的濃度數值為：0.2～50μg/ml；脂肪干細胞的數目的數值為：0.7～0.9×10⁴個；培養基的濃度數值為：5～15μg/ml。本發明還公開了促進干細胞生長的培養液的制備方法。本發明提供的促進干細胞生長的培養液及其制作方法中，生長因子取自于自然界，成本較低，易于獲得。

本申請案是申請號：201910893061.8﹑申請日：2019.09.20﹑發明名稱：白樺茸水提取物在促進脂肪干細胞生長中的應用的發明案的分案申請。

技術領域

本發明涉及培養液技術領域，特別涉及一種促進干細胞生長的培養液及其制作方法。

背景技術

干細胞是具有無限的再生能力的未分化細胞，可以通過適當的生物信號和人體外部刺激分化成特定細胞，分為胚胎干細胞和成體干細胞。在受精后約14天從胚胎中提取的胚胎干細胞是能夠在實驗室中無限增殖的全能細胞，并且可以分化成身體的所有細胞和組織。然而，盡管具有這些優點，但在醫學用途方面存在局限性，例如生物倫理學，其可以破壞可以生長為生命的胚胎，免疫不相容性，以及可能導致產生不受控制的腫瘤或畸胎瘤的問題。

與受精卵發育早期獲得的胚胎干細胞不同，成體干細胞是指在發育過程后在身體各部分發現的具有各種形式再生能力的干細胞。未分化狀態能夠自我增殖，具有多能性，可以分化成不同組織的細胞。成體干細胞的缺點在于它們比胚胎干細胞更難增殖。然而，由于確定了分化細胞的類型和方向，因此在移植中具有安全性和相對較少局限性的優點，例如不易腫瘤形成和免疫排斥，但由于干細胞培養相對困難，體外培養受到限制難以進行大量增殖。

脂肪干細胞與人體中的其他組織細胞相比具有相對低的提取風險，可以通過簡單的吸脂術獲得大量的脂肪組織。此外，它在培養中表現出穩定的生長和增殖，因此當誘導分化時，可以根據生長信號刺激分化成各種細胞。然而，由于生長緩慢和分化差，脂肪干細胞通過添加生長因子來促進細胞生長，從而有助于細胞培養。要添加的生長因子包括VEGF(血管內皮生長因子)﹑FGF(成纖維細胞生長因子)﹑IGF(胰島素樣生長因子)﹑KGF(角質形成細胞生長因子)﹑HGF(肝細胞生長因子)和PDGF(血小板生長因子)，這些生長因子成本較高，而且，涉及人體組織，不易取得。

發明內容

為了解決以上問題，本發明提供一種具有自然界且成本較低的生長因子的促進干細胞生長的培養液及其制作方法。

本發明公開了一種促進干細胞生長的培養液，所述的培養液包括脂肪干細胞﹑白樺茸微粒和培養基，所述的白樺茸微粒的濃度數值為：0.2～50μg/ml；脂肪干細胞的數目的數值為：0.7～0.9×10⁴個；培養基的濃度數值為：5～15μg/ml。

進一步地，所述的培養基成分為：胎牛血清和抗生素的混合液體組織。

進一步地，所述的白樺茸微粒的濃度數值為：0.25～50μg/ml。

進一步地，培養時長為18小時，所述的白樺茸微粒的濃度數值為：5～50μg/ml。

本發明公開了一種促進干細胞生長的培養液的制作方法，包括以下步驟：

S1、提取白樺茸蘑菇粉，將0.1g白樺茸蘑菇粉加入到100ml蒸餾水中浸泡，加熱至100～120℃，浸泡時長為：30～50分鐘，在5400RPM的轉速下離心4～7分鐘，取上層清液，過濾，制成10mg/ml濃度，在-80℃～-100℃的溫度條件下進行保存；

S2、提取脂肪，通過吸脂術從人體腹部或大腿提取脂肪，將提取的脂肪和生理鹽水以1：1的比例混合，離心處理，提取脂肪；