[發(fā)明專利]鑒定牙周膜干細(xì)胞的試劑盒及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011431904.1
• 申請(qǐng)日: 2020-12-10
• 公開（公告）號(hào): CN112226521B
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 雷童;王建;張曉霜;劉彥彥;王治世;杜宏武
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 康妍葆（北京）干細(xì)胞科技有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6888
• 分類號(hào): C12Q1/6888;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 張金銘

本發(fā)明提供了一種鑒定牙周膜干細(xì)胞的試劑盒及方法，涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明的發(fā)明人通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，CKB基因和/或CKB蛋白在牙周膜干細(xì)胞中具有顯著高表達(dá)的特性，因此，通過檢測(cè)CKB基因和/或CKB蛋白在待測(cè)細(xì)胞樣品中的表達(dá)情況，能夠準(zhǔn)確、有效地鑒定牙周膜干細(xì)胞。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種鑒定牙周膜干細(xì)胞的試劑盒及方法。

背景技術(shù)

隨著干細(xì)胞和再生醫(yī)學(xué)的興起，針對(duì)干細(xì)胞的基礎(chǔ)和應(yīng)用研究層出不窮。從胚胎干細(xì)胞，造血干細(xì)胞，骨髓干細(xì)胞到誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞，都被驗(yàn)證為潛在的臨床材料。口腔干細(xì)胞在近幾年開始興起。從21世紀(jì)開始，陸陸續(xù)續(xù)共有8種干細(xì)胞從人的牙科組織中被分離出來。

牙周膜干細(xì)胞（PDLSCs）作為口腔干細(xì)胞的一種，可以從成人的牙周膜組織中得到，材料可以來源于牙科手術(shù)丟棄物中得到。研究表明，相比于其他干細(xì)胞，PDLSCs同樣具有高度增殖和多向分化的潛能，可以在適當(dāng)條件下分化成骨，成脂等。另外，PDLSCs不具有倫理問題，也無致瘤性，故而被視為胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞的潛在替代物。

PDLSCs從組織中的分離培養(yǎng)過程，需要克服很多困難。口腔組織環(huán)境復(fù)雜，組織之間除了牙冠的包被以外沒有明顯界限。故而在從組織提取PDLSCs時(shí)，需要避免組織之間的污染，才能得到牙周膜組織。另外，由于口腔組織中可以分離得到多種干細(xì)胞，他們?cè)诿庖弑硇停鲋澈头只芰τ执蠖枷嗨疲袌?chǎng)上也沒有相應(yīng)的產(chǎn)品和方法報(bào)道，用來區(qū)分表征牙周膜干細(xì)胞并與其他細(xì)胞做區(qū)分。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種鑒定牙周膜干細(xì)胞的試劑盒，以至少緩解了現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題之一。

本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供一種鑒定牙周膜干細(xì)胞的方法。

本發(fā)明提供了一種鑒定牙周膜干細(xì)胞的試劑盒，所述試劑盒包括用于檢測(cè)CKB基因和/或CKB蛋白的產(chǎn)品。

進(jìn)一步的，包括用于檢測(cè)CKB基因的引物。

進(jìn)一步的，所述用于擴(kuò)增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，或與SEQ ID NO.1和/或SEQ ID NO.2具有至少85%同一性的核苷酸序列。

進(jìn)一步的，所述用于擴(kuò)增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列，或與SEQ ID NO.3和/或SEQ ID NO.4具有至少85%同一性的核苷酸序列。

進(jìn)一步的，所述用于擴(kuò)增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列，或與SEQ ID NO.5和/或SEQ ID NO.6具有至少85%同一性的核苷酸序列。

進(jìn)一步的，所述用于擴(kuò)增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列，或與SEQ ID NO.7和/或SEQ ID NO.8具有至少85%同一性的核苷酸序列。

進(jìn)一步的，所述用于擴(kuò)增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列，或與SEQ ID NO.9和/或SEQ ID NO.10具有至少85%同一性的核苷酸序列。

進(jìn)一步的，所述用于擴(kuò)增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的核苷酸序列，或與SEQ ID NO.11和/或SEQ ID NO.12具有至少85%同一性的核苷酸序列。

進(jìn)一步的，所述試劑盒還包括內(nèi)參基因的檢測(cè)引物。

進(jìn)一步的，所述內(nèi)參基因包括GAPDH。