[發明專利]水牛21個STR位點的熒光標記復合擴增試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 202011429669.4
• 申請日: 2020-12-07
• 公開（公告）號: CN112342304B
• 公開（公告）日: 2023-10-13
• 發明（設計）人: 史明皓;張雷;梅興林;王皋;陳林麗;夏子芳;鄭衛國
• 申請（專利權）人: 無錫中德美聯生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 余俊杰

1.水牛21個STR位點的熒光標記復合擴增試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括擴增21個水牛STR位點的特異性引物，其中STR位點為：CSSM019、BM2113、CSSM047、CSSM038、SPS113、CSRM060、CSSM057、CSSM033、CSSM029、CSSM022、CSSM043、UMN0929、TGLA126、ETH225、CSSM041、CSSM013、TGLA227、FJ232023、ILSTS030、FJ232022、CSSM032。

2.根據權利要求1所述的水牛21個STR位點的熒光標記復合擴增試劑盒，其特征在于，所述特異性引物序列如下：CSSM019、SEQ ID NO:1～2；BM2113、SEQ ID NO:3～4；CSSM047、SEQ ID NO:5～6；CSSM038、SEQ ID NO:7～8；SPS113、SEQ ID NO:9～10；CSRM060、SEQ IDNO:11～12；CSSM057、SEQ ID NO:13～14；CSSM033、SEQ ID NO:15～16；CSSM029、SEQ IDNO:17～18；CSSM022、SEQ ID NO:19～20；CSSM043、SEQ ID NO:21～22；UMN0929、SEQ IDNO:23～24；TGLA126、SEQ ID NO:25～26；ETH225、SEQ ID NO:27～28；CSSM041、SEQ ID NO:29～30；CSSM013、SEQ ID NO:31～32；TGLA227、SEQ ID NO:33～34；FJ232023、SEQ ID NO:35～36；ILSTS030、SEQ ID NO:37～38；FJ232022、SEQ ID NO:39～40；CSSM032、SEQ ID NO:41～42。

3.根據權利要求1所述的水牛21個STR位點的熒光標記復合擴增試劑盒，其特征在于，所述特異性引物在擴增體系中的終濃度為：CSSM019、0.4μM；BM2113、0.2μM；CSSM047、0.2μM；CSSM038、0.32μM；SPS113、0.4μM；CSRM060、0.6μM；CSSM057、0.4μM；CSSM033、0.6μM；CSSM029、0.2μM；CSSM022、0.2μM；CSSM043、0.4μM；UMN0929、0.4μM；TGLA126、0.4μM；ETH225、0.2μM；CSSM041、0.8μM；CSSM013、0.8μM；TGLA227、0.2μM；FJ232023、0.2μM；ILSTS030、0.6μM；FJ232022、0.6μM；CSSM032、0.6μM。

4.根據權利要求1所述的水牛21個STR位點的熒光標記復合擴增試劑盒，其特征在于，所述特異性引物分為四組：CSSM019、BM2113、CSSM047、CSSM038、SPS113、CSRM060為第一組，CSSM057、CSSM033、CSSM029、CSSM022、CSSM043、UMN0929為第二組，TGLA126、ETH225、CSSM041、CSSM013為第三組，TGLA227、FJ232023、ILSTS030、FJ232022、CSSM032為第四組；每對引物中至少一條采用熒光染料標記其5’端。

5.根據權利要求4所述的水牛21個STR位點的熒光標記復合擴增試劑盒，其特征在于，所述熒光染料為：6-FAM、HEX、TAMRA、ROX中任意一種，且每組采用的熒光標記不同。

6.根據權利要求1所述的水牛21個STR位點的熒光標記復合擴增試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括特異性復合擴增引物、反應混合液、21個基因座位點的等位基因、熱啟動Taq酶、DNA標準品、sdH₂O和熒光分子量內標；其中反應混合液的組成為：MgCl₂ 7.5mM,Tris-HCl 125mM，KCl 125mM，dNTPs 7.5mM，BSA2g/L。