[發明專利]一種采用熒光分光光度計法測定腹膜透析液中鋁鹽的方法

在審

• 申請號: 202011428563.2
• 申請日: 2020-12-09
• 公開（公告）號: CN112577936A
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 李繼仁;趙萍萍;田景云
• 申請（專利權）人: 西安樂析醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N1/28;G01N1/38
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 黨桃桃

本發明屬于醫藥行業中注射劑產品的鋁鹽測定技術領域，具體涉及一種采用熒光分光光度計法測定腹膜透析液中鋁鹽的方法。本發明方法通過對樣品制備方法和特殊測定參數進行研究和測試，發現α?倒捻子素(全稱為1,3,6?三羥基?7?甲氧基?2,8?雙(3?甲基?2?丁烯基)?9H?氧雜蒽?9?酮)和Al³⁺在乙酸乙酯中形成的絡合物具有很好的穩定性和較強的熒光強度，且對樣品用濃鹽酸進行處理，并用1,1?二甲基丙酮(簡稱MIPK)進行萃取，消除過渡金屬雜質離子干擾。同時對特殊測定參數進行了規定，研究后的新方法方法學驗證良好，滿足腹膜透析液產品鋁鹽檢查。

技術領域

本發明屬于醫藥行業中注射劑產品的鋁鹽測定技術領域，具體涉及一種采用熒光分光光度計法測定腹膜透析液中鋁鹽的方法。

背景技術

腹膜透析液是由葡萄糖、乳酸鈉、氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂配制而成的澄明、無菌、無熱原和內毒素、pH值適宜的溶液。臨床上可用于治療急性或慢性腎功能衰竭、藥物中毒、頑固性心力衰竭、嚴重電解質紊亂，如高血鉀等。由于腹膜透析液中水是唯一的溶劑且水中不可避免存在微量的鋁元素，正常人鋁主要從消化道攝入，大部分經腸道排出，小部分吸收入血循環由腎臟排出，而尿毒癥患者不僅鋁的排出量大大降低，消化道的吸收量也較正常人增多，故易于造成體內鋁的蓄積和中毒。相關研究顯示透析期間腎性骨病、貧血、腦病等均與微量的元素鋁有關，多項文獻中規定腹膜透析液產品中鋁含量必須維持在10ppb以下。因此開發出檢出限低、準確度和精密度高的鋁鹽分析方法，是保障產品質量的關鍵因素。

《中國藥典》和現有的國標方法對于鋁鹽檢查方法并未有任何記載，為實現對腹膜透析液產品質量的嚴格把控，滿足更高的產品注冊要求，現有分析方法來源于《歐洲藥典》9.0版，操作過程為：取待測液600ml，用0.1M氫氧化鈉調節pH值至6.0，并加入10ml醋酸鹽緩沖液(pH6.0)，作為供試品溶液?；旌?0ml醋酸鹽緩沖液(pH6.0)和10ml水，作為空白溶液?；旌?mL的標準鋁溶液(2ppm Al)，10mL醋酸鹽緩沖液(pH 6.0)和9mL水，作為對照品溶液。將供試品溶液，對照品溶液，空白溶液分別用8-羥基喹啉的氯仿溶液(0.5％)提取三次(20ml，20ml，10ml)合并提取液至50ml量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，搖勻。照鋁鹽(2.4.17)和熒光法(2.2.21)在激發波長392nm、發射波長518nm處測定，計算，即得。

通過現有方法對腹膜透析液鋁鹽進行檢查時，結果重現性差且數據不穩定，樣品和一定濃度的鋁對照溶液測定過程中經常會出現數據異常大的負值結果。方法學驗證過程中線性相關系數小于0.995，線性呈現不相關，而一般方法線性相關系數至少滿足0.999，才證明線性良好；測定空白樣品數據很難穩定在0附近，10次空白樣品測定結果標準偏差約為200，導致檢測限結果偏高，難以實現對產品鋁含量的精確控制；對12批樣品進行耐用性(溶液穩定性)實驗，一部分樣品呈現數據異常大的負值結果，一部分樣品兩次測定數據波動大，RD％值超出標準限度15％，穩定性差。且現有方法對樣品中的可能存在的干擾測定的雜質離子未進行處理，對除波長外的其他特殊測定參數未進行任何規定，使得測定結果重現性和穩定性差，方法學驗證不通過。因此，需開發出重現性和穩定性良好，方法學驗證良好的鋁鹽測定方法。

以上問題測定數據見下表：

表1使用現有方法進行測定的線性結果

表2使用現有方法進行測定的檢測限結果

表3使用現有方法進行測定的12批樣品耐用性結果

發明內容