[發明專利]一種擬穴青蟹人工性逆轉方法

在審

• 申請號: 202011421812.5
• 申請日: 2020-12-08
• 公開（公告）號: CN112544516A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 馬洪雨;牛澤瑤;邱必巡
• 申請（專利權）人: 汕頭大學
• 主分類號: A01K61/59
• 分類號: A01K61/59
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 彭妙玲;周增元

本發明屬于水產養殖技術領域，公開了一種擬穴青蟹人工性逆轉方法，包括：(1)擬穴青蟹促雄性腺的獲?。?2)促雄性腺提取物的制備；(3)促雄性腺提取物的體內注射；(4)注射后的仔蟹飼養；(5)性逆轉個體的鑒定。本發明具有方法易行、可操作性強、易掌握，可將遺傳型雌蟹性逆轉為生理型雄蟹等特點。該技術既適合用于開展擬穴青蟹性別決定機制基礎理論研究，又適合用于單性化生產等產業應用領域。

技術領域

本發明屬于水產養殖技術領域，特別涉及一種擬穴青蟹人工性逆轉方法。

背景技術

擬穴青蟹(Scylla paramamosain)俗稱青蟹，屬于節肢動物門(Arthropoda)、軟甲綱(Malacostraca)、十足目(Decapoda)、梭子蟹科(Portunidae)、青蟹屬(Scylla)。擬穴青蟹肉質鮮美、營養豐富，是高檔的海產品，素有“海中人參”之美譽。我國是擬穴青蟹的主要產區，自江蘇沿海向南的整個東南沿海均是其自然分布區，同時也是人工養殖的主要區域。近年來，我國擬穴青蟹人工養殖產量一直保持在14萬噸以上，養殖規模在50萬畝左右，年產值達220多億元人民幣。由此可見，擬穴青蟹養殖產業在我國海洋經濟中占有重要的一席之地。

在蝦蟹類甲殼動物中，雄性輸精管上生有促雄性腺，該器官具有促進精巢發育和維持雄性性征的作用。研究表明，切除羅氏沼蝦雄蝦的促雄性腺，能夠誘導其雌性化，生成卵巢、輸卵管和排卵孔；而將卵巢組織移入去促雄性腺的雄蝦個體中,可以誘導卵巢發育和孵化室的形成。此外，采用移植促雄性腺的方法能夠誘導克氏原螯蝦未成熟雌性個體雄性化。

有關蟹類性逆轉技術的研究報道非常少，這嚴重限制了經濟蟹類性別控制和單性育種研究的開展。

發明內容

本發明的目的在于提供一種擬穴青蟹人工性逆轉方法，解決現有技術無法控制青蟹性別的技術問題。本實驗室前期研究表明，擬穴青蟹的染色體性別決定機制為ZZ/ZW類型，并研制了快速鑒定遺傳性別的PCR技術。本發明擬在此基礎上，進一步研制擬穴青蟹雌性逆轉為雄性的性別控制技術，為深入開展擬穴青蟹性別控制提供重要的理論和材料支撐。

為了解決上述目的，本發明采用的技術方案如下：

一種擬穴青蟹人工性逆轉方法，其特征在于，從雄性擬穴青蟹獲取促雄性腺提取物，注射到擬穴青蟹仔蟹體內。

優選的，包括如下步驟：

(1)挑選所述雄性擬穴青蟹，解剖并摘取促雄性腺；

(2)人工研磨所述促雄性腺，低溫離心，收集上清液，獲得所述促雄性腺提取物，保存待用；

(3)利用微量注射器將上述促雄性腺提取物注射到擬穴青蟹仔蟹體內；

(4)在室內水泥池中飼養注射后的所述擬穴青蟹仔蟹，確保水體含有足量的溶解氧、餌料，并維持優良水質；

(5)根據腹部形態進行所述擬穴青蟹仔蟹的生理型性別判斷，并利用分子技術進行所述擬穴青蟹仔蟹的遺傳型性別判斷，從而判斷哪些個體發生了性逆轉。

優選的，所述雄性擬穴青蟹為精巢發育成熟的個體。

優選的，所述擬穴青蟹仔蟹所處的發育階段為仔蟹III期，且體肢完整，活力好。

優選的，所述注射的部位為所述擬穴青蟹仔蟹的游泳足和第四步足間隙。

優選的，所述注射的量為每只所述擬穴青蟹仔蟹注射0.2-0.3個當量的所述促雄性腺提取物。

以每個促雄性腺獲得1個當量促雄性腺提取物計算，每只擬穴青蟹仔蟹須注射0.2～0.3個當量的促雄性腺提取物。