[發明專利]一株分泌替加環素單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其應用

有效

• 申請號: 202011402073.5
• 申請日: 2020-12-04
• 公開（公告）號: CN112375745B
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發明（設計）人: 胥傳來;路倩倩;匡華;徐麗廣;孫茂忠;劉麗強;宋珊珊;吳曉玲;郝昌龍;胡擁明
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/44;C07K14/795;C07K14/77;C07C237/48;G01N33/577;C12R1/91
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所(普通合伙) 32104
• 代理人: 時旭丹;張仕婷

1.一株分泌替加環素單克隆抗體的雜交瘤細胞株ABC03，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，地址北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，分類命名為單克隆細胞株，保藏日期2019年11月28日，保藏編號CGMCCNo.19176。

2.替加環素單克隆抗體，其特征在于：它由權利要求1所述保藏編號為CGMCC No.19176的單克隆細胞株ABC03分泌產生。

3.一種替加環素完全抗原，其特征在于：簡稱為TGC-NH₂-KLH，分子式

如下：

。

4.一種替加環素包被原，其特征在于：簡稱為TGC-NH₂-OVA，分子式如下：

。

5.權利要求3所述替加環素完全抗原的制備方法，其特征在于：將替加環素半抗原TGC-NH₂溶于無水N，N-二甲基甲酰胺DMF中，加入HCl冰浴避光反應；加入過量的NaNO₂反應得到A液；將鑰孔血藍蛋白KLH用碳酸鹽緩沖溶液CBS稀釋，得到B液；將A液加入到B液中進行反應，得到反應液；用磷酸鹽緩沖液PBS透析反應液，得到替加環素完全抗原TGC-NH₂-KLH。

6.根據權利要求5所述替加環素完全抗原的制備方法，其特征在于：稱取11.42mg替加環素半抗原TGC-NH₂溶于無水N，N-二甲基甲酰胺DMF中，加入57 μL 1M HCl冰浴避光反應，30 min后加入過量的NaNO₂反應30min，得到A液；將6mg 鑰孔血藍蛋白KLH用0.01M碳酸鹽緩沖溶液CBS稀釋至3mg/mL，得到B液；將A液加入到B液中進行反應2h，得到反應液；用0.01M磷酸鹽緩沖液PBS透析反應液，得到替加環素完全抗原TGC-NH₂-KLH。

7.權利要求4所述替加環素包被原的制備方法，其特征在于：稱取替加環素半抗原TGC-NH₂溶于無水N，N-二甲基甲酰胺DMF中，加入HCl冰浴避光反應，加入過量的NaNO₂反應，得到A液；將雞卵白蛋白OVA用0.01M碳酸鹽緩沖溶液CBS稀釋，得到B液；將A液加入到B液中進行反應，得到反應液；用磷酸鹽緩沖液PBS透析反應液，得到替加環素包被原TGC-NH₂-OVA。

8.根據權利要求7所述替加環素包被原的制備方法，其特征在于：稱取8.72mg替加環素半抗原TGC-NH₂溶于無水N，N-二甲基甲酰胺DMF中，加入32 μL 1M HCl冰浴避光反應，30min后加入過量的NaNO₂反應30min，得到A液；將6mg 雞卵白蛋白OVA用0.01M碳酸鹽緩沖溶液CBS稀釋至3mg/mL，得到B液；將A液加入到B液中進行反應2h，得到反應液；用0.01M磷酸鹽緩沖液PBS透析反應液，得到包被原TGC-NH₂-OVA。

9.權利要求2所述替加環素單克隆抗體的應用，其特征在于：將其應用于替加環素血藥濃度的分析檢測。