[發(fā)明專利]一種馴化米根霉的方法及生產(chǎn)乳酸的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011401137.X
• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN112501107B
• 公開（公告）日: 2023-03-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尹豐偉;孫小龍;付永前;鄭偉龍;羅希;張瑩瑩;尹龍飛;賈強(qiáng);孔鈺婷
• 申請（專利權(quán)）人: 臺州學(xué)院
• 主分類號: C12N1/36
• 分類號: C12N1/36;C12N1/38;C12P7/56;C12R1/845
• 代理公司: 北京潤平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283
• 代理人: 周春雨

1.一種馴化米根霉的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：將所述米根霉利用含有銅離子的馴化培養(yǎng)基進(jìn)行馴化，以獲得高產(chǎn)乳酸的菌株，其中，所述含有銅離子的馴化培養(yǎng)基由水溶性銅鹽、碳源、氮源和無機(jī)鹽組成，所述馴化培養(yǎng)基中銅離子以30μmol/L為起始馴化濃度，再以10μmol/L的梯度提高直至馴化菌種能夠在銅離子濃度為100μmol/L的馴化培養(yǎng)基中正常生長至細(xì)胞干重為4g/L；

或者，該方法包括以下步驟：利用含有銅離子的固態(tài)馴化培養(yǎng)基和含有乳酸根離子的液態(tài)馴化培養(yǎng)基對所述米根霉進(jìn)行交替馴化，以獲得高產(chǎn)乳酸的菌株，其中，所述含有銅離子的固態(tài)馴化培養(yǎng)基由水溶性銅鹽和PDA固態(tài)培養(yǎng)基組成，所述含有乳酸根離子的液態(tài)馴化培養(yǎng)基由水溶性乳酸鹽、碳源、氮源和無機(jī)鹽組成，所述液態(tài)馴化培養(yǎng)基中乳酸根離子的濃度為0.1-1mol/L、所述固態(tài)馴化培養(yǎng)基中銅離子的濃度為30-100μmol/L，所述交替馴化過程中所述固態(tài)馴化培養(yǎng)基中銅離子的濃度以每次5-15μmol/L的梯度進(jìn)行遞增，所述液態(tài)馴化培養(yǎng)基中乳酸根離子的濃度以每次0.1-0.2mol/L的梯度進(jìn)行遞增。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述水溶性乳酸鹽選自乳酸鈉、乳酸鋰、乳酸鈣和乳酸鎂中的至少一種；

所述水溶性銅鹽選自氯化銅、硫酸銅、醋酸銅和溴化銅中的至少一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述含有乳酸根離子的液態(tài)馴化培養(yǎng)基中，所述碳源選自葡萄糖、糊精、小麥淀粉和蔗糖中的至少一種；

所述氮源選自蛋白胨、酵母粉、棉籽粉和豆粕中的至少一種；

所述無機(jī)鹽選自磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀和硫酸鎂中的至少一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述交替馴化的過程包括：將所述米根霉馴化至能夠在銅離子濃度為80-100μmol/L的所述固態(tài)馴化培養(yǎng)基中生長出米根霉孢子，且所述米根霉孢子能夠在乳酸根離子濃度為0.8-1mol/L的所述液態(tài)馴化培養(yǎng)基中生長至細(xì)胞干重為2-5g/L。