[發(fā)明專利]一種基于量子點微球免疫層析試紙條的新冠病毒檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011394861.4
• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN112379089A
• 公開（公告）日: 2021-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 曾珍;韓芳;陳劍;韋海燕
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇麥莎實業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/58;G01N33/543;G01N33/68
• 代理公司: 鹽城市大豐區(qū)豐晟知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 32454
• 代理人: 邵瓏;葛瀟敏

1.一種基于量子點微球免疫層析試紙條的新冠病毒檢測方法，其特征在于包括如下具體步驟：

S1. 全血、血漿和血清的處理：采集全血分離血漿或血清作為檢測樣本；

S2. 取出量子點微球免疫層析試紙條，將其放于潔凈操作臺上；

S3. 吸取樣本，滴加至加樣孔中；

S4. 滴加完成后，等待10-15min，判定結(jié)果；

S5. 判定結(jié)果：使用目視判定或使用熒光檢測儀判定結(jié)果。

2.如權(quán)利要求1所述的基于量子點微球免疫層析試紙條的新冠病毒檢測方法，其特征在于：所述免疫層析試紙條包括底板，所述底板上依次排列設(shè)置樣品墊、結(jié)合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊；所述結(jié)合墊上包被有量子點微球標(biāo)記的新冠病毒抗原蛋白或新冠病毒抗體；所述新冠病毒抗原蛋白或新冠病毒抗體能與待檢測樣中含有的新冠病毒待檢測目標(biāo)物特異性結(jié)合，所述的硝酸纖維素膜上設(shè)有檢測線和質(zhì)控線，所述質(zhì)控線處設(shè)有能與待檢測目標(biāo)物特異性結(jié)合的生物標(biāo)記物，所述檢測線包被有羊抗雞IgY多抗，所述質(zhì)控線靠近所述吸水墊一側(cè)設(shè)置。

3.如權(quán)利要求2所述的基于量子點微球免疫層析試紙條的新冠病毒檢測方法，其特征在于：所述生物標(biāo)記物為新冠病毒抗原蛋白抗人總抗體。

4.如權(quán)利要求2所述的基于量子點微球免疫層析試紙條的新冠病毒檢測方法，其特征在于：所述的樣品墊、結(jié)合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊依次重疊放置，黏貼于底板上。

5.如權(quán)利要求2-4任一所述的基于量子點微球免疫層析試紙的新冠病毒檢測方法，其特征在于：所述基于量子點微球免疫層析試紙的制備具體包括以下步驟：

S1. 結(jié)合墊的制備：將制備好的包被有量子點微球標(biāo)記的新冠病毒抗原蛋白或新冠病毒抗體，噴涂在所述的結(jié)合墊上，干燥備用；

S2. 樣品墊的制備：預(yù)先用PBS緩沖液浸泡15-30分鐘處理，干燥備用；

S3. 硝酸纖維素膜的制備：在硝酸纖維素膜上噴涂羊抗雞IgY多抗得到檢測線，然后噴涂生物標(biāo)記物得到質(zhì)控線；

S4. 試紙的組裝：在底板上依次相互交錯地設(shè)置樣品墊、結(jié)合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，得到量子點微球免疫層析試紙條。

6.如權(quán)利要求5所述的基于量子點微球免疫層析試紙條的新冠病毒檢測方法，其特征在于：所述步驟S1中，新冠病毒抗原蛋白或新冠病毒抗體的制備方法包括以下步驟：

S11. 量子點微球的活化：將量子點微球加入緩沖液中；加入EDC和NHS；在37℃搖床中恒溫孵育；再至離心機中離心，棄上清，加入緩沖液重懸；

S12. 量子點微球的偶聯(lián)：在上述得到的量子點微球緩沖液中加入新冠病毒抗原蛋白或新冠病毒抗體，在37℃搖床中恒溫孵育；

S13. 量子點微球的封閉：將上述得到的完成偶聯(lián)的量子點微球緩沖液中加入封閉液，在37℃搖床中恒溫孵育，棄上清，加入緩沖液重懸。