[發(fā)明專利]一種知柏地黃丸指紋圖譜的檢測(cè)方法及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011391810.6
• 申請(qǐng)日: 2020-12-01
• 公開（公告）號(hào): CN112285264A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田禾苗;溫方方;姜鵬;詹常森;張正光
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海和黃藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所(普通合伙) 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

本發(fā)明提供一種知柏地黃丸指紋圖譜的檢測(cè)方法。本發(fā)明還提供了上述知柏地黃丸指紋圖譜的檢測(cè)方法在知柏地黃丸中成分的質(zhì)量檢測(cè)中的用途及其質(zhì)量檢測(cè)方法。本發(fā)明進(jìn)一步提供了上述知柏地黃丸中5種成分含量的測(cè)定方法。本發(fā)明更進(jìn)一步提供了一種知柏地黃丸中多味藥材指紋圖譜的篩選方法。本發(fā)明提供的一種知柏地黃丸指紋圖譜的檢測(cè)方法及其應(yīng)用，建立了知柏地黃丸的高效液相指紋圖譜，能夠?qū)χ氐攸S丸中5個(gè)化學(xué)成分進(jìn)行了定量分析，并對(duì)知柏地黃丸中各單味藥材色譜峰進(jìn)行了歸屬確證，能夠從原料源頭進(jìn)行有效監(jiān)測(cè)，嚴(yán)格控制原藥材的質(zhì)量，保證知柏地黃丸成分中有效成分的量相對(duì)穩(wěn)定，從而保證臨床用藥的安全有效。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥成分檢測(cè)的技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種知柏地黃丸指紋圖譜的檢測(cè)方法及其應(yīng)用，具體涉及一種知柏地黃丸指紋圖譜的檢測(cè)方法及其在質(zhì)量檢測(cè)中應(yīng)用。

背景技術(shù)

知柏地黃丸為2020版《中國(guó)藥典》收錄品種。是由知母、黃柏、熟地黃、山藥、制山茱萸、茯苓、牡丹皮和澤瀉等8味中藥材細(xì)粉，過篩，混勻，并與煉蜜加水泛丸后干燥，制成的棕黑色水蜜丸。具有滋陰降火之功效，臨床主要用于陰虛火旺，潮熱盜汗，口干咽痛，耳鳴遺精，小便短赤等癥狀。

中藥指紋圖譜具有整體、宏觀、模糊分析等特點(diǎn)，可通過對(duì)中藥整體特征的描述，采用適當(dāng)模糊處理方式，能較全面地反映出其內(nèi)含化學(xué)成分的種類及數(shù)量，達(dá)到整體質(zhì)量控制的目的，因此成為中藥質(zhì)量控制的有效手段，已廣泛應(yīng)用于中藥質(zhì)量監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)領(lǐng)域。其中色譜指紋圖譜分析可以使中藥所含多種化學(xué)組分的整體特征可視化，從而披露出常規(guī)檢驗(yàn)難以發(fā)現(xiàn)的質(zhì)量問題。指紋圖譜是根據(jù)中藥多組分、多靶點(diǎn)的整體綜合作用的特點(diǎn)，從“全成分”的角度出發(fā)的一種現(xiàn)代中藥質(zhì)量控制方法，對(duì)非單一成分藥物的質(zhì)量控制更加全面。目前缺乏對(duì)知柏地黃丸進(jìn)行系統(tǒng)的定性定量研究。因此，有必要建立知柏地黃丸的指紋圖譜與多成分含量測(cè)定方法，能夠完成對(duì)知柏地黃丸中成分的定性定量分析，以便對(duì)知柏地黃丸進(jìn)行有效的質(zhì)量控制。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于以上所述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提供一種知柏地黃丸指紋圖譜的檢測(cè)方法及其應(yīng)用，采用優(yōu)化條件的前處理及高效液相色譜方法，建立了知柏地黃丸的高效液相指紋圖譜，從不同側(cè)面突出反映不同類別化學(xué)成分對(duì)知柏地黃丸指紋圖譜系統(tǒng)的貢獻(xiàn)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)知柏地黃丸全方化學(xué)成分的檢測(cè)，較全面的反映知柏地黃丸中各成分的現(xiàn)狀，為整體控制和評(píng)價(jià)知柏地黃丸質(zhì)量提供參考依據(jù)。

為實(shí)現(xiàn)上述目的及其他相關(guān)目的，本發(fā)明第一方面提供一種知柏地黃丸指紋圖譜的檢測(cè)方法，包括以下步驟：

1)供試品溶液的制備：將知柏地黃丸樣品加入有機(jī)溶劑溶解，超聲提取后冷卻，過濾，取續(xù)濾液即得供試品溶液；

2)對(duì)照品溶液的制備：將莫諾苷、馬錢苷、芒果苷、鹽酸小檗堿和丹皮酚對(duì)照品，加入有機(jī)溶劑超聲溶解，配成對(duì)照品溶液；

3)測(cè)定：采用相同色譜條件的高效液相色譜(HPLC)法分別測(cè)定供試品溶液和對(duì)照品溶液，獲得供試品溶液的指紋圖譜和對(duì)照品溶液的指紋圖譜，將供試品溶液的指紋圖譜與對(duì)照品溶液的指紋圖譜進(jìn)行比較，對(duì)供試品溶液指紋圖譜中的指標(biāo)成分進(jìn)行歸屬定位，從而獲得知柏地黃丸指紋圖譜。

優(yōu)選地，步驟1)中，所述知柏地黃丸樣品為將知柏地黃丸生藥粉碎后過篩，獲得的知柏地黃丸生藥粉末樣品。

更優(yōu)選地，所述過篩為過四號(hào)篩。

優(yōu)選地，步驟1)中，所述知柏地黃丸樣品在制備供試品溶液前要進(jìn)行⁶⁰Co-γ射線輻照。

更優(yōu)選地，所述⁶⁰Co-γ射線輻照的劑量為3-10KGy。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述⁶⁰Co-γ射線輻照的劑量為6KGy。

更優(yōu)選地，所述⁶⁰Co-γ射線輻照的最大吸收劑量≤6KGy。