[發明專利]測定人體胃泌素G17含量的磁微粒化學發光檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202011391200.6
• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN112684166A
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 路鵬曉;王鵬;王海森
• 申請（專利權）人: 北京利德曼生化股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/577;G01N21/76
• 代理公司: 天津翰林知識產權代理事務所(普通合伙) 12210
• 代理人: 付長杰

本發明為測定人體胃泌素G17含量的磁微粒化學發光檢測試劑盒，試劑盒包括：磁分離試劑、R1試劑、R2試劑、校準品液系列和化學發光底物液；R2試劑為堿性磷酸酶標記的胃泌素G17單克隆抗體稀釋液，化學發光底物液為堿性磷酸酶催化發光的底物液，R1試劑為樣品稀釋液，校準品液系列為含有不同濃度胃泌素G17抗原的稀釋液；其特征在于，所述磁分離試劑為包被胃泌素G17單克隆抗體的免疫磁珠。本發明極大地提高了免疫反應的信號強度和靈敏度，使低含量物質在進行免疫結合時也能產生很強的化學發光信號，為胃泌素G17的檢測提供了一種更準確、精確、方便、快捷和簡單的方法。

技術領域

本發明涉及醫用診斷試劑領域，特別是涉及一種采用磁微粒化學發光技術和抗原-抗體結合技術檢測人體胃泌素G17含量的磁微粒化學發光檢測試劑盒。

背景技術

我國是全世界當之無愧的“胃病大國”，消化性潰瘍、慢性胃炎、胃癌是常見的胃類疾病，胃癌更是最常見的消化道腫瘤，為癌癥相關死亡的主要原因。我國是胃癌高發國，約占世界胃癌數的1/2。相關文獻報道，不同時期的胃癌經內鏡微創治療或外科手術治療后五年生存率差異甚大。因此，早檢出，早治療是改善胃癌患者生存品質的重要渠道。

胃泌素是一種主要由胃竇和十二指腸的G細胞分泌的胃腸激素，對調節消化道功能和維持其結構完整有重要作用。目前發現的胃泌素分子，包括胃泌素原、甘氨酸延伸型胃泌素和酰胺化胃泌素等多種類型。其中，人體95％以上有生物活性的胃泌素是α-酰胺化胃泌素，主要含兩種異構體G-17和G-34,其中80％～90％是6-17。

胃泌素17，是一個應用于臨床醫學的全新胃部指標，受到了國內外許多專家的關注。我國不僅將胃泌素17聯合胃蛋白酶原輔助診斷胃黏膜疾病寫入了“中國早期胃癌篩查及內鏡診治共識意見”，國家科技部、中國健康促進基金會更是將該項目列為了科研課題。日本、韓國、芬蘭已將其列入了胃癌防治規劃。

胃泌素17是由胃竇部及十二指腸近端黏膜的G細胞分泌的一種胃腸激素。人體中G-17的生理作用主要是刺激胃酸和胃蛋白酶的分泌，促進黏膜的生長及調節胃腸道功能，因此對于胃腸道正常功能的維持具有非常重要的作用。在不同的病理條件下，G-17水平會發生不同的變化。當發生胃黏膜萎縮后，由于胃竇腺體喪失導致胃竇G細胞數量減少，進入血液循環的G-17水平降低；胃體萎縮導致胃酸分泌降低，對胃竇G細胞的抑制作用減弱，血清G-17分泌增加。因此認為血清G-17是胃竇萎縮的血清學標志物。

磁微粒化學發光法是免疫分析技術的新發展，該技術將磁性微球應用于免疫檢測的固相，大大提高了反應的表面積，增加了抗原或抗體的吸附量，加快了反應速度，提高了檢測的靈敏度。相比于時間免疫分辨熒光、免疫層析及ELI SA方法，具有準確度高、特異性好、精密度高、線性范圍廣、試劑穩定性良好等特點；目前磁微粒化學發光免疫分析技術已成為在免疫診斷領域全球使用最廣泛的分析方法，也是免疫試劑重要的發展方向之一。現有技術胃泌素17的檢測方法主要有酶聯免疫法、時間分辨熒光免疫分析法、化學發光法等，然而這些方法具有線性范圍窄，檢測時間長等缺點，無法滿足臨床需求。

因此，目前尚需一種污染小、靈敏度高、操作簡單、自動化程度高、特異性好、成本低的胃泌素G17檢測試劑盒和使用方法。

發明內容

本發明旨在開發一種靈敏度高、無污染、操作簡單、特異性好并且成本低廉的一種測定人體胃泌素G17含量的磁微粒化學發光檢測試劑盒。

基于上述目的，本發明提供一種測定人體胃泌素G17含量的磁微粒化學發光檢測試劑盒，包括：磁分離試劑、R1試劑、R2試劑、校準品液系列和化學發光底物液；磁分離試劑包括包被胃泌素G17單克隆抗體的免疫磁珠，R1試劑為樣品稀釋液，R2試劑為堿性磷酸酶標記的胃泌素G17單克隆抗體稀釋液，校準品液系列為含有不同濃度胃泌素G17抗原的稀釋液，化學發光底物液為堿性磷酸酶催化發光的底物液。

所述包被胃泌素G17單克隆抗體的免疫磁珠包被方法為：