[發明專利]人乳頭瘤病毒特異性T細胞受體及其抗腫瘤用途

有效

• 申請號: 202011387641.9
• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN112480239B
• 公開（公告）日: 2022-06-07
• 發明（設計）人: 高福;孫萌;譚曙光;張賀琳;王杰
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C07K14/725
• 分類號: C07K14/725;C12N15/12;C12N15/867;A61K38/17;A61P35/00;A61P31/20;G01N33/574;G01N33/569
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 宋明;張瑩

本發明提供人乳頭瘤病毒E6基因的T細胞表位特異性T細胞受體鼠源m2P8D TCR，其人源化形式h2P8D TCR，及它們的抗原結合片段，該兩種T細胞受體分別由α、β兩條肽鏈組成，還提供編碼它們的核酸，包含該核酸的載體，包含該載體的宿主細胞及它們的抗腫瘤用途；還提供人乳頭瘤病毒E6基因的T細胞表位特異性T細胞受體鼠源m2P8D TCR，其人源化形式h2P8D TCR及這兩者的制備方法。所述兩種特異性T細胞受體及其抗原結合片段能夠作為免疫效應活化物刺激機體的免疫反應，從而產生抗腫瘤等疾病的作用效果。

技術領域

本發明屬于醫藥領域，具體涉及能夠特異性識別人乳頭瘤病毒基因的T細胞表位的T細胞受體(TCR)或其抗原結合片段。

背景技術

2011年，癌癥超過心臟病，成為全球第一大死亡原因。WHO在2013年12月公布，全球每年新增癌癥患者數已經超過1400萬名，這與2008年的統計結果1270萬人相比，人數大幅增加。截至2020，癌癥每年造成960萬人死亡，全球每年約1萬億美金投入癌癥診療。

在20世紀80年代早期，Allison及其他研究者確定了在T細胞表面負責識別抗原的αβT細胞受體(TCR)的基因結構。80年代后期，Boone、Rosenberg、Old等人分別研究發現，不同腫瘤病人體內均存在一些腫瘤特異性抗原，能夠被T細胞所識別并特異性殺傷腫瘤細胞，使得腫瘤免疫治療的希望重新燃起，大量研究致力于腫瘤治療性疫苗的研究和開發。2013年免疫抗癌療法被Science雜志評為年度10大科技突破之首。

近年來，隨著干細胞生物學、免疫學、分子技術、組織工程技術等的快速發展，細胞免疫治療作為一種安全而有效的治療手段，在腫瘤等治療中的作用越來越突出。當前，新型細胞治療技術的研究和開發已經成為解決腫瘤等相關疾病的重要研究領域。

過繼性T細胞療法(Adoptive cell therapy，ACT)是一種高度個性化的癌癥治療方法，它可以通過重建癌癥患者體內缺失或較弱的免疫系統，以達到抗腫瘤的效果。ACT療法的機制為從腫瘤患者體內分離免疫活性細胞，在體外進行擴增和功能鑒定，然后向患者回輸，從而達到直接殺傷腫瘤或激發機體的免疫應答而殺傷腫瘤細胞的目的。因此，尋找僅表達在癌癥組織上而非正常必需組織上的抗原成為ACT療法的限制因素。

目前，ACT療法包括T細胞受體工程化細胞(TCR-T)治療技術和嵌合抗原受體工程化T細胞(CAR-T)治療技術。通過這些技術，ACT在多種癌癥，例如黑色素瘤、宮頸癌、淋巴瘤、白血病、膽總管癌和成神經細胞瘤中都取得了很好的療效。

當前，CAR-T在急/慢性粒細胞性白血病、淋巴瘤等疾病的治療中也實現了重大突破，大大提高了患者生存率及生存質量。然而，在實體瘤治療研究中，由于有限的特異性靶點使得CAR-T細胞的治療前景并不明朗。

與CAR-T細胞利用抗體靶向胞外抗原不同，TCR是所有T細胞表面的特征性標志，以非共價鍵與CD3結合，形成TCR-CD3復合物。外周血中，有90％-95％的T細胞表達TCR。TCR是由α、β兩條肽鏈組成，屬于免疫球蛋白超家族，其抗原特異性存在于V區(CDR1、CDR2、CDR3)，其中，TCR擁有的CDR3直接決定了其抗原結合特異性。經過基因改造的TCR的T細胞，可以對腫瘤細胞表面上的抗原分子進行特異性識別，進而針對腫瘤細胞產生免疫反應。

TCR-T細胞免疫治療最早在20世紀末應用于HIV的治療中，目前已在骨髓瘤、黑色素瘤、食管癌、肝癌等治療中表現出積極的治療前景。近年來，研究發現基于MART-1、MAGE-A4、NY-ESO-1、WT-1等腫瘤抗原而進行了特異性TCR工程化改造的自體免疫細胞在治療黑色素瘤、食管癌、多發性骨髓瘤、滑膜細胞肉瘤等中表現出了良好的開發前景。