[發明專利]一種高密度液體釀酒酵母的制作方法

在審

• 申請號: 202011387611.8
• 申請日: 2020-12-02
• 公開（公告）號: CN112522124A
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 孫華;潘登;戴繼業
• 申請（專利權）人: 南京市酵富生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/18
• 分類號: C12N1/18;C12R1/865
• 代理公司: 天津垠坤知識產權代理有限公司 12248
• 代理人: 王忠瑋

一種高密度液體釀酒酵母的制作方法，制作方法包括實驗室擴培、液體酵母的工廠擴培、液體酵母的存儲和運輸；具體包括以下步驟：步驟一：從甘油培養基中選取生長良好的菌株進行種子培養，經過三次擴培后運送至生產車間；步驟二：對酵母轉移罐出口和擴培罐入口進行消毒，在擴培罐培養后進行取樣監測；步驟三：測定酵母密度和活性均合格后灌裝在無菌容器中，密封觀察鼓起情況，運輸前將上清液換成無菌生理鹽水，置于保溫容器中冷鏈運輸；本發明高密度液體釀酒酵母的制作方法生產效率高，生產周期短，產品高度濃縮，對后期出酒品質影響績效，節能環保，獲得的酵母活性超高，品質純凈，即投即用。

【技術領域】

本發明涉及生物科技領域，具體為一種高密度液體釀酒酵母的制作方法。

【背景技術】

近年來，精釀啤酒成為啤酒類消費的熱點，精釀啤酒相較于傳統工業啤酒，品種豐富且風味更佳；精釀啤酒釀造要求高，尤其對于酵母的選擇更加嚴格，目前我國絕大多數精釀企業都在使用進口的干酵母粉，不僅品種少，出酒風味也遠不及國外相應企業使用的液體酵母。少數品質要求較高的企業，花費巨資從國外購入液體酵母，但由于物流和存儲條件的不確定性，往往效果不佳，而且由于液體酵母菌的種類豐富且對生產，儲存和運輸要求極高，制約了國內精釀啤酒的生產制造。

由此可見，提供一種高密度液體釀酒酵母的制作方法是本領域亟需解決的問題。

【發明內容】

針對上述問題，本發明高密度液體釀酒酵母的制作方法生產效率高，生產周期短，產品高度濃縮，對后期出酒品質影響績效，節能環保，獲得的酵母活性超高，品質純凈，即投即用，出酒風味純凈且正宗。

為解決上述問題，本發明提供一種高密度液體釀酒酵母的制作方法，制作方法包括實驗室擴培、液體酵母的工廠擴培、液體酵母的存儲和運輸；具體包括以下步驟：

步驟一：從甘油培養基中選取生長良好的菌株進行種子培養，經過三次擴培后運送至生產車間；

步驟二：對酵母轉移罐出口和擴培罐入口進行消毒，在擴培罐培養后進行取樣監測；

步驟三：測定酵母密度和活性均合格后灌裝在無菌容器中，密封觀察鼓起情況，運輸前將上清液換成無菌生理鹽水，置于保溫容器中冷鏈運輸。

進一步的，所述步驟一中從-80℃10％甘油培養基中取出酵母菌株，用無菌接種環挑去少量菌液在酵母瓊脂培養基上劃線，22℃培養40-48小時，選取生長良好的菌落用于種子培養液。

進一步的，所述實驗室擴培中第一次擴培取5-10個生長良好的菌落于15mL酵母液體培養基，22℃，200rpm搖床培養40-48小時。

進一步的，所述實驗室擴培中，一次擴培后，當OD達到2-2.2 之間時進行二次擴培，將15mL培養物接種于200mL酵母液體培養基擴大培養，將培養燒瓶置于磁力攪拌器上，調節速度至200rpm。培養40-48小時。

進一步的，所述實驗室擴培中二次擴培后，當OD達到2-2.2之間時進行三次擴培，將200mL培養物接種于5000mL酵母液體培養基擴大培養，將培養燒瓶置于磁力攪拌器上，調節速度至200rpm，培養40-48小時。

進一步的，所述步驟二中消毒過程包括酵母擴培罐中煮沸消毒酵母液體培養基，冷卻至22℃；用酒精消毒酵母轉移罐輸出口和擴培罐酵母入口，用無菌軟管連接酵母轉移罐輸出口和擴培罐酵母入口，用無菌氣泵將酵母注入酵母擴培罐。

進一步的，所述擴培罐培養時攪拌器120rmp，并通入無菌空氣，調節進氣量為6L/min/200L培養基，壓0.1mP。

進一步的，所述取樣監測項目包括取樣監測酵母數、pH值、糖度、腸道致病菌、金葡菌、乳酸菌，每8小時一次。