[發(fā)明專利]一種大棗藥材中環(huán)磷腺苷含量的測定方法及其應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202011381157.5
• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN112326845A
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周厚成;胡昌江;羅俊;姚麗琴;費(fèi)文波;鐘磊;吳琦;周維;馮健
• 申請（專利權(quán)）人: 四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34
• 代理公司: 成都天嘉專利事務(wù)所(普通合伙) 51211
• 代理人: 趙玉玲

本發(fā)明公開了一種大棗藥材中環(huán)磷腺苷含量的測定方法及其應(yīng)用，屬于中藥分析、質(zhì)量鑒別及控制技術(shù)領(lǐng)域。基于高效液相色譜儀，檢測大棗藥材中環(huán)磷腺苷的含量，對大棗藥材成分進(jìn)行定量分析，實(shí)現(xiàn)對大棗藥材的質(zhì)量控制；本方法操作簡單、分析速度快、準(zhǔn)確且重復(fù)性好，為大棗藥材中環(huán)磷腺苷等成分分析提供了科學(xué)可靠的分析方法，為完善大棗藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種中藥中有效成分的測定方法及其應(yīng)用，尤其涉及一種大棗藥材中環(huán)磷腺苷含量的測定方法及其應(yīng)用，屬于中藥分析、質(zhì)量鑒別及控制技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

大棗藥材為鼠李科植物棗Ziziphus jujuba Mill.的干燥成熟果實(shí)，為秋季果實(shí)成熟時采收、曬干。其可補(bǔ)中益氣，養(yǎng)血安神。用于脾虛食少，乏力便溏，婦人臟躁。其中，大棗藥材中有效成分環(huán)磷腺苷是為參與調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的第二信使物質(zhì)，其作用非常廣泛，能使心肌收縮力增強(qiáng)，舒張平滑肌、擴(kuò)張冠狀動脈血管、改善肝功能、促進(jìn)神經(jīng)再生，促進(jìn)呼吸鏈氧化酶的活性及改善心肌缺氧等。

目前，極少有對大棗藥材中含量指標(biāo)成分(特別是環(huán)磷腺苷)進(jìn)行研究，比如：中國藥典(2015年版)中也未規(guī)定大棗藥材的含量指標(biāo)成分。于2015年12月23日公開了一種公開號為CN105181862A，名稱為“大棗及其提取物與制劑的質(zhì)量控制方法及應(yīng)用”的專利文獻(xiàn)，其中，具體公開：通過高效液相色譜串聯(lián)蒸發(fā)光散射檢測器的分離分析技術(shù)，借助一測多評方法，通過計(jì)算校正因子，實(shí)現(xiàn)對大棗中的6個三萜類化學(xué)成分含量進(jìn)行計(jì)算。其以白樺脂酸、齊墩果酸、烏蘇酸、樺木酮酸、齊墩果酮酸、烏蘇酮酸為對照品，采用反相Cl8色譜柱。在該專利文獻(xiàn)中，其對照品多樣，不易控制；供試品制備需要經(jīng)過提取，減壓蒸干，加甲醇再溶解，操作較為復(fù)雜；其檢測條件需要串聯(lián)蒸發(fā)光散射檢測器，并需要推薦色譜柱，對設(shè)備要求較高；并且，在該專利文獻(xiàn)中，未進(jìn)行準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性、重復(fù)性等方法學(xué)研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在解決現(xiàn)有技術(shù)問題，而提出了一種大棗藥材中環(huán)磷腺苷含量的測定方法及其應(yīng)用。在本技術(shù)方案中，基于普通的高效液相色譜儀，檢測大棗藥材中環(huán)磷腺苷的含量，對大棗藥材成分進(jìn)行定量分析，實(shí)現(xiàn)對大棗藥材的質(zhì)量控制；本方法操作簡單、分析速度快、準(zhǔn)確且重復(fù)性好，為大棗藥材中環(huán)磷腺苷等成分分析提供了科學(xué)可靠的分析方法，為完善大棗藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)奠定了基礎(chǔ)。

為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，提出如下的技術(shù)方案：

一種大棗藥材中環(huán)磷腺苷含量的測定方法，包括如下步驟：

A.色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱長為250mm，內(nèi)徑為4.6mm，粒度為5μm；

色譜柱柱溫：30℃；

流動相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液，其中，甲醇與磷酸二氫鉀溶液的體積比為10：90；

流動相流速：1.0mL/min；

進(jìn)樣量：10μL；

波長：259nm；

理論板數(shù)按環(huán)磷腺苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000；

B.對照品溶液的制備

取環(huán)磷腺苷對照品，精密稱定，加甲醇，制成每1mL含10μg的溶液，即得；

C.供試品溶液的制備

取本品粉末，過三號篩，稱定1.0g，加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率600W，頻率40kHz)20min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；

D.測定

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。