[發(fā)明專利]一種香附藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑、配方顆粒HPLC特征圖譜的構(gòu)建及檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011381149.0
• 申請(qǐng)日: 2020-11-30
• 公開（公告）號(hào): CN112666277B
• 公開（公告）日: 2022-07-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周厚成;胡昌江;吳琴;黃美華;李莎;梅國(guó)榮;陳蓉;周維
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/04;G01N30/06
• 代理公司: 成都天嘉專利事務(wù)所(普通合伙) 51211
• 代理人: 趙玉玲

本發(fā)明公開了一種香附藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑、配方顆粒HPLC特征圖譜的構(gòu)建及檢測(cè)方法，屬于中藥分析、質(zhì)量鑒別及控制技術(shù)領(lǐng)域。在本技術(shù)方案中，基于高效液相色譜法建立特征圖譜，以及根據(jù)香附中多含倍半萜等脂溶性物質(zhì)，水溶性物質(zhì)較少，以及通過已知成分指認(rèn)，未找到已知的特征成分峰，故在新建特征圖譜方法基礎(chǔ)上，加入一種內(nèi)標(biāo)物蘆丁作為參照物S峰來對(duì)所有特征峰進(jìn)行監(jiān)控，以及特定供試品溶液制備和特定色譜條件等設(shè)置，對(duì)其整體質(zhì)量進(jìn)行控制。本方法操作簡(jiǎn)單，具有精密度高、穩(wěn)定性好、重復(fù)性好及準(zhǔn)確度高等優(yōu)勢(shì)，為中藥材質(zhì)量鑒別提供有效依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種中藥特征圖譜的構(gòu)建及檢測(cè)方法，尤其涉及一種香附藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑、配方顆粒HPLC特征圖譜的構(gòu)建及檢測(cè)方法，屬于中藥分析、質(zhì)量鑒別及控制技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

香附為莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根莖，具有疏肝解郁，理氣寬中，調(diào)經(jīng)止痛的功效。香附標(biāo)準(zhǔn)湯劑是由該藥材經(jīng)炮制后按固定的制備工藝水煎煮而成的凍干粉，為確保香附標(biāo)準(zhǔn)湯劑質(zhì)量的均一性、穩(wěn)定性，需建立一種新的特征圖譜方法對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行把控。

于2018年08月21日公開了一種公開號(hào)為CN108426963A，名稱為“一種醋香附HPLC指紋圖譜的構(gòu)建方法”的專利文獻(xiàn)，其中，具體公開：將醋香附飲片粉末以甲醇提取獲得供試品溶液；以α-香附酮、香附烯酮、5-羥甲基糠醛為對(duì)照品；測(cè)定10批以上醋香附并進(jìn)行分析比較，得到由12個(gè)共有特征峰構(gòu)成的醋香附HPLC指紋圖譜。

于20141119公開了一種公開號(hào)為CN104155399A，名稱為“一種四制香附飲片的質(zhì)量控制方法”的專利文獻(xiàn)，其中，建立四制香附HPLC指紋圖譜，以活性成分α-香附酮為基準(zhǔn)峰，計(jì)算基準(zhǔn)峰中α-香附酮的含量，其它主要活性成分的指紋峰以α-香附酮為參照，計(jì)算每個(gè)活性成分指紋峰以α-香附酮計(jì)的相對(duì)含量。本發(fā)明的方法具有可操作性，僅需用一個(gè)已知的對(duì)照品α-香附酮成分含量即可控制其他未知主要有效成分的相對(duì)含量，達(dá)到控制四制香附飲片質(zhì)量的一種科學(xué)方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有技術(shù)問題的不足，而提出了一種香附藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑、配方顆粒HPLC特征圖譜的構(gòu)建及檢測(cè)方法。在本技術(shù)方案中，基于香附中多含倍半萜等脂溶性物質(zhì)，水溶性物質(zhì)較少，以及通過已知成分指認(rèn)，未找到已知的特征成分峰，故在新建特征圖譜方法基礎(chǔ)上，加入一種內(nèi)標(biāo)物蘆丁作為參照物S峰來對(duì)所有特征峰進(jìn)行監(jiān)控，從而對(duì)其整體質(zhì)量進(jìn)行控制。

為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，提出如下的技術(shù)方案：

一種香附藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑、配方顆粒HPLC特征圖譜的構(gòu)建方法，包括如下步驟：

A.內(nèi)標(biāo)溶液的制備：取蘆丁對(duì)照品，加70％甲醇溶解，制成每1mL含330μg的溶液，即得；

B.對(duì)照藥材參照物溶液的制備：取香附對(duì)照藥材2.0g，置具塞錐形瓶中，加入70％甲醇25mL，超聲處理(功率600W，頻率40kHz)45min，放冷，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，得對(duì)照藥材提取液；另取內(nèi)標(biāo)溶液1mL于10mL容量瓶中，加對(duì)照藥材提取液至刻度線，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；

C.供試品溶液的制備：稱取本品0.5～2.0g，置具塞錐形瓶中，加入70％甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率600W，頻率40kHz)45min，放冷，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，得供試品提取液；另取內(nèi)標(biāo)溶液1mL于10mL容量瓶中，加供試品提取液至刻度線，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；

D.建立：分別取所得對(duì)照藥材參照物溶液和所得供試品溶液，注入至高效液相色譜儀，測(cè)定，建立HPLC特征圖譜；

高效液相色譜儀內(nèi)色譜條件滿足：

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱長(zhǎng)為250mm，內(nèi)徑為4.6mm，粒度為5μm；

色譜柱柱溫：30℃；