[發明專利]一種基于HPLC-ELSD測定柏子仁藥材中α-亞麻酸含量的方法

在審

• 申請號: 202011378166.9
• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN112345670A
• 公開（公告）日: 2021-02-09
• 發明（設計）人: 周厚成;胡昌江;辜新月;陳玉梅;葉志萍;宋媛;周維
• 申請（專利權）人: 四川新綠色藥業科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/16;G01N30/74
• 代理公司: 成都天嘉專利事務所(普通合伙) 51211
• 代理人: 趙玉玲

本發明公開了一種基于HPLC?ELSD測定柏子仁藥材中α?亞麻酸含量的方法，屬于中藥分析及質量鑒別、標準控制技術領域。利用高效液相色譜一蒸發光散射檢測器（HPLC?ELSD）檢測柏子仁中的α?亞麻酸（高級脂肪酸）含量，該方法操作簡單、分析速度快、準確且重復性好，彌補了柏子仁中脂肪酸成分（特別是α?亞麻酸）絕對含量研究空白現象等不足，為柏子仁中α?亞麻酸等脂肪酸成分分析提供了科學可靠的分析方法，為完善中藥柏子仁的質量標準奠定了基礎。

技術領域

本發明涉及一種柏子仁藥材中α-亞麻酸含量的測定方法，尤其涉及一種基于HPLC-ELSD測定柏子仁藥材中α-亞麻酸含量的方法，屬于中藥分析及質量鑒別、標準控制技術領域。

背景技術

柏子仁為柏科植物側柏Platycladus orientalis(L.)Franco的干燥成熟種仁，味甘、平，具有養心安神、潤腸通便、止汗等功效，臨床上常用于治療虛煩、失眠、心悸怔忡、陰虛盜汗、腸燥便秘等癥狀。由于其富含大量脂肪油，能有效的降血脂、預防動脈粥樣硬化和保護心肌等。脂肪油主要成分為不飽和脂肪酸，包括α-亞麻酸、亞油酸、油酸及花生四烯酸等，其中，柏子仁富含的α-亞麻酸屬人體必需的不飽和脂肪酸，選用其作為柏子仁質量控制成分指標。

目前，中國藥典(2020年版)中未收載關于柏子仁中α-亞麻酸的含量測定方法，以及其他方面關于柏子仁中α-亞麻酸含量測定的技術也幾乎沒有。在現有技術中，涉及柏子仁中脂肪酸的測定多采用GC、GC-MS、柱前皂化或衍生化HPLC法，比如：論文“柏子仁和柏子仁霜中脂肪酸的GC-MS比較分析研究，徐新剛等，2009”和“側柏葉子與種子脂肪酸的GC-MS比較分析研究，丁小麗等，2008”中，記載了采用GC-MS比較分析柏子仁和子仁霜(側柏葉子與種子)中的脂肪酸。

但GC與GC-MS法易發生異構化、氧化和分解等副反應，且GC-MS法在質量控制中難以推廣；柱前衍生化HPLC法操作步驟繁瑣，容易造成誤差，這些方法的檢測靈敏度、反應的完全化及定量的準確性等方面均存在一定的不足。

因此，建立α-亞麻酸的HPLC-ELSD分析方法，是當前急需解決的技術問題。

發明內容

本發明旨在解決現有技術問題，而提出了一種基于HPLC-ELSD測定柏子仁藥材中α-亞麻酸含量的方法。在本技術方案中，利用高效液相色譜一蒸發光散射檢測器(HPLC-ELSD)檢測柏子仁中的α-亞麻酸(高級脂肪酸)含量，該方法操作簡單、分析速度快、準確且重復性好，彌補了柏子仁中脂肪酸成分(特別是α-亞麻酸)絕對含量研究空白現象等不足。其中，蒸發光散射檢測器為一種通用型質量檢測器，不依賴于被測成分的紫外吸收，克服了部分脂肪酸結構中沒有共扼雙鍵，而在紫外光譜中沒有吸收和吸收弱的困難，其具有穩定性好，靈敏度高等特點；

本HPLC-ELSD測定柏子仁藥材中α-亞麻酸含量的方法，為柏子仁中α-亞麻酸等脂肪酸成分分析提供了科學可靠的分析方法，為完善中藥柏子仁的質量標準奠定了基礎。

為了實現上述技術目的，提出如下的技術方案：

一種基于HPLC-ELSD測定柏子仁藥材中α-亞麻酸含量的方法，包括如下步驟：

A.對照品溶液的制備：取α-亞麻酸對照品，加甲醇，制成每1mL含0.2mg的溶液，即得；

B.供試品溶液的制備：取本品粉末，過二號篩，稱定0.5g，置具塞錐形瓶中，加入甲醇10mL，稱定重量，超聲處理(功率600W，頻率40kHz)30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

C.標準曲線的繪制：取所得對照品溶液，注入HPLC-ELSD進行測定，記錄對應的色譜圖和峰面積；

以對照品含量的對數為橫坐標X，峰面積的對數為縱坐標Y，繪制標準曲線，計算得回歸方程；