[發(fā)明專利]一種增加蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體中腺苷含量的方法

有效

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• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN112322504B
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發(fā)明（設計）人: 范祎立;王鵬;袁峰;紀樂軍;朱增亮
• 申請（專利權）人: 江蘇神華藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/38;C12R1/79
• 代理公司: 北京思創(chuàng)大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

本發(fā)明公開了一種增加蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體中腺苷含量的方法，包括菌種活化、種子液的制備、發(fā)酵罐發(fā)酵和提取步驟，所述發(fā)酵步驟采用的發(fā)酵培養(yǎng)基為：黃豆餅粉20g?25g/L，葡萄糖10g?15g/L，蔗糖10g?15g/L，磷酸二氫鉀0.3?0.5g/L，MgSO₄·7H₂O0.2g?0.4g/L，無水氯化鈣0.25g/L，豆油0.4g/L，肌苷酸0.02?0.1g/L，余量為水。本發(fā)明在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加肌苷酸，不僅可以提高蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉中的腺苷含量，還能提高蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉產量。

技術領域

本發(fā)明屬于食品保健品微生物技術領域，涉及一種增加蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體中腺苷含量的方法。

背景技術

冬蟲夏草是多種寄生真菌生長在蟲體之上的復合體；在我國主要分布在西藏地區(qū)，此外在云南、四川、甘肅、新疆也有分布；是一種珍貴的食藥用真菌。其體內不僅含有豐富的營養(yǎng)物質，還含有能夠對人體多種疾病有預防和治療功效的功能性成分；比如核苷類、甾醇類、蟲草素類等。但由于生長條件等影響，冬蟲夏草產量極低，在市場上供不應求。

腺苷是冬蟲夏草中主要的功能性成分，它做為一種內源性核苷廣泛分布在人體之中，對人體的許多系統(tǒng)和組織都具有重要的生理學功能。腺苷可通過核苷類物質的代謝途徑參與到人體的免疫和代謝系統(tǒng)之中，對心血管疾病、慢性支氣管炎、肝硬化、高血脂等疾病有顯著的預防和治療功效，同時腺苷也是蟲草類產品質量評價的一項重要指標。

蝙蝠蛾擬青霉(蟲草)是一株從冬蟲夏草中分離出來的寄生真菌，利用蝙蝠蛾擬青霉菌株通過深層液態(tài)發(fā)酵法產生的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中含有與冬蟲夏草一致的功能性成分，其優(yōu)勢在于能夠人工控制產生大量的菌絲體，同時菌絲體做為蝙蝠蛾擬青霉的初始形態(tài)，其多種功能性成分的含量高于子實體。此外，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中的腺苷含量也是考察蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉質量水平主要指標之一(中國藥典規(guī)定腺苷含量≥0.2％為合格蟲草菌粉)。

肌苷酸(IMP)又名次黃嘌呤核苷酸，是在RNA中發(fā)現(xiàn)的一種核苷酸，目前許多研究表明其具有風味特性。在細菌核苷類物質代謝中，肌苷酸被發(fā)現(xiàn)是腺苷重要的前體物質，其對于腺苷的代謝可能具有一定的影響作用；在真菌的腺苷代謝過程中，肌苷酸是否也是前體物質，能否對腺苷的提升產生一定的影響還沒有相關報道。

發(fā)明內容

本發(fā)明所要解決的技術問題是提升現(xiàn)有產品的質量水平，提供一種增加蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體中腺苷含量的方法。本發(fā)明在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加腺苷代謝途徑中可能的前體物食品級肌苷酸(IMP)，不僅可以提高蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉中的腺苷含量，還能提高蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉產量。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：

一種增加蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體中腺苷含量的方法，包括菌種活化、種子液的制備、發(fā)酵罐發(fā)酵和提取步驟，所述發(fā)酵步驟采用的發(fā)酵培養(yǎng)基為：黃豆餅粉20g-25g/L，葡萄糖10g-15g/L，蔗糖10g-15g/L，磷酸二氫鉀0.3-0.5g/L，MgSO₄·7H₂O0.2g-0.4g/L，無水氯化鈣0.25g/L，豆油0.4g/L，肌苷酸0.02-0.07g/L，余量為水。在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加肌苷酸0.02-0.1g/L，優(yōu)選添加肌苷酸0.02-0.07g/L。在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的肌苷酸不僅可以提高蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉中的腺苷含量，還能提高蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉產量。此外，肌苷酸的量加入過少不能對腺苷積累產生積極影響，加入肌苷酸的量過多會發(fā)生反饋抑制，明顯降低蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉中的腺苷含量。

優(yōu)選所述的菌種活化是將蝙蝠蛾擬青霉菌的原始菌株接種在斜面培養(yǎng)基上，于18℃-26℃培養(yǎng)72小時，制備活化后的斜面種子。

優(yōu)選所述斜面培養(yǎng)基組成為:麩皮50g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨2g/L，KH₂PO₄1g/L,硫酸鎂0.3g/L，瓊脂粉15g/L。