[發明專利]一種snhg17-KO基因敲除小鼠模型的構建方法和應用

在審

• 申請號: 202011373844.2
• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN112553199A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 高琳;洪馬林;鄒暢;周文斌
• 申請（專利權）人: 深圳市人民醫院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/85;C12N15/55;A01K67/027
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 陳秋夢

本發明公開了一種snhg17?KO基因敲除小鼠模型的構建方法和應用，涉及基因工程技術領域。該gRNA分子的靶點序列選自snhg17基因的外顯子1～外顯子6中的至少一個外顯子，該gRNA能夠用于有效切割敲除小鼠基因組中的snhg17基因，為snhg17在腫瘤中的作用機制的研究提供可靠的動物模型。

技術領域

本發明涉及基因工程技術領域，具體而言，涉及一種snhg17-KO基因敲除小鼠模型的構建方法和應用。

背景技術

LncRNA(Long non-coding RNA，lnc RNA)是一類長度大于200個核苷酸，在細胞內不能翻譯蛋白的RNA；大多數lncRNA本身能夠被5‘端加帽、剪接及3‘端進行聚腺苷酸化而缺乏開放性閱讀框，同時能夠被RNA聚合酶II轉錄。LncRNA被認為是分子支架、結構性RNA或調節分子參與細胞的遺傳、剪接、mRNA的穩定性以及調控小RNA(miRNA)的“分子海綿”。

小核RNA(Small nucleolar RNA，snRNA)是一類主要在細胞核內表達的小分子RNA，長度約為60-300個核苷酸。SnRNA宿主基因為lncRNA，在腫瘤中起到抑制或促進癌細胞存活的功能。

人類小核RNA宿主基因17(Small nucleolar RNA host gene 17，SNHG17)是一種重要的lncRNA，然而，其具體的分子機制尚不明確。

因此，深入研究SNHG17(snhg17)在腫瘤中的作用機制，開發新型靶點藥物對臨床腫瘤治療提供一種探索性科學理論依據。

鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種snhg17-KO基因敲除小鼠模型的構建方法和應用。

本發明是這樣實現的：

第一方面，本發明實施例提供了一種gRNA分子，所述gRNA分子的靶點序列選自snhg17基因的外顯子1～外顯子6中的至少一個外顯子。

優選地，所述gRNA分子包括：如SEQ ID No.1～4所示序列中的至少一條。

優選地，所述gRNA的靶點序列為外顯子1～外顯子3中的至少一個外顯子。

優選地，所述gRNA包括如SEQ ID No.3～4所示的序列中的至少一條。

第二方面，本發明實施例提供了一種重組載體，其含有如前述任一實施方式所述的gRNA分子的堿基序列。

優選地，所述重組載體為表達載體。

優選地，所述重組載體上包含有Cas9蛋白的核酸序列。

第三方面，本發明實施例提供了如前述任一實施方式所述的重組載體在制備用于敲除snhg17基因的試劑中的應用。

第四方面，本發明實施例提供了一種用于敲除snhg17-KO基因的試劑盒，其包括如前述任一實施方式所述的gRNA分子或如前述任一實施方式所述的重組載體。

第五方面，本發明實施例提供了一種snhg17-KO基因敲除小鼠模型的構建方法，其包括：采用如前述任一實施方式所述的gRNA分子或如前述任一實施方式所述的重組載體，敲除小鼠基因組中的snhg17基因。

優選地，所述構建方法包括將所述gRNA分子或所述重組載體導入小鼠的受精卵中。

本發明具有以下有益效果：

本發明實施例提供了一種gRNA分子，所述gRNA分子的靶點序列選自snhg17基因的外顯子1～外顯子6中的至少一個外顯子，該gRNA能夠用于有效切割敲除小鼠基因組中的snhg17基因，為snhg17在腫瘤中的作用機制的研究提供可靠的動物模型。