[發明專利]一種基因高表達在人臍帶間充質干細胞體外培養促進其增殖方面的用途

有效

• 申請號: 202011369743.8
• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN112481219B
• 公開（公告）日: 2023-01-13
• 發明（設計）人: 張川
• 申請（專利權）人: 上海東方星際干細胞科技有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/867
• 代理公司: 泉州市興博知識產權代理事務所(普通合伙) 35238
• 代理人: 王成紅

本發明公開了一種基因高表達在人臍帶間充質干細胞體外培養促進其增殖方面的用途。本發明發現，提高基因miR?876?5p的表達水平可以促進人臍帶間充質干細胞體外增殖，因而可以通過在細胞培養基中添加提高基因miR?876?5p表達水平的物質在體外提高種子細胞hUC?MSCs的獲得效率和數量。

技術領域

本發明屬于干細胞領域，涉及干細胞的培養，具體涉及一種基因高表達在人臍帶間充質干細胞體外培養促進其增殖方面的用途。

背景技術

間充質干細胞(MSCs)是一類來源于發育早期中胚層、具有多向分化及自我更新潛能的成體干細胞。MSCs的來源主要包括骨髓、脂肪、臍帶、胎盤、羊膜等。其中，人臍帶間充質干細胞(hUC-MSCs)因取材方便、來源廣泛、免疫原性低且不受倫理學爭議等眾多優勢，成為最具潛力的種子細胞。

種子細胞應用第一重要的就是數量，因此，提高種子細胞體外增殖速度一直是研究熱點。

發明內容

本發明是為了提供一種基因高表達在人臍帶間充質干細胞體外培養促進其增殖方面的用途，以在體外提高種子細胞hUC-MSCs的數量。

技術方案：

一種通過提高基因表達水平的方法在人臍帶間充質干細胞體外培養促進其增值方面的用途，所述基因為miR-876-5p。

一種用于人臍帶間充質干細胞體外培養促進其增值的培養基，在培養基中添加提高基因miR-876-5p表達水平的物質。

技術效果：

本發明發現，提高基因miR-876-5p的表達水平可以促進人臍帶間充質干細胞體外增殖，因而可以通過在細胞培養基中添加提高基因miR-876-5p表達水平的物質在體外提高種子細胞hUC-MSCs的獲得效率和數量。

附圖說明

圖1為人臍帶間充質干細胞倒置顯微鏡觀察結果；可見細胞呈梭形，呈漩渦狀生長，符合人臍帶間充質干細胞的生長特點。

圖2為各組人臍帶間充質干細胞中miR-876-5p相對表達水平；與空白對照組相比，過表達組人臍帶間充質干細胞中miR-876-5p表達水平顯著升高(P＜0.05)，說明miR-876-5p過表達慢病毒已經成功將miR-876-5p轉染進入人臍帶間充質干細胞中。與空白對照組相比，陰性對照組miR-876-5p表達水平無顯著差異(P＞0.05)。

圖3為各組人臍帶間充質干細胞培養48h細胞數量(×10⁵個/孔)；過表達組人臍帶間充質干細胞數量顯著高于空白對照組(P＜0.05)，陰性對照組人臍帶間充質干細胞數量與空白對照組無顯著差異(P＞0.05)。

具體實施方式

一、實驗材料

人臍帶間充質干細胞購自上海傳秋生物科技有限公司。

胎牛血清、DMEM/F12(1:1)培養基購自購自美國Gibco公司。

miR-876-5p過表達慢病毒及其陰性對照慢病毒、RT-PCR引物序列由吉凱基因構建。

二、實驗方法

1、人臍帶間充質干細胞的培養、傳代、形態觀察和表型檢測