[發(fā)明專(zhuān)利]HDAC5作為孕期感染子代大鼠模型外周標(biāo)志物的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011366492.8
• 申請(qǐng)日: 2020-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112400799B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李文強(qiáng);蘇璽;楊勇鋒;宋盟;邵明龍;陳騰飛;呂路線
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 河南省精神病醫(yī)院（新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院）
• 主分類(lèi)號(hào): A01K67/02
• 分類(lèi)號(hào): A01K67/02;C12Q1/6883
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.HDAC5作為孕期感染子代大鼠模型外周標(biāo)志物的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：孕鼠準(zhǔn)備：選擇SPF級(jí)10-14周齡的SD種鼠，新環(huán)境適應(yīng)2周后開(kāi)始育種，每3-5只雄鼠與1只雌鼠置于一個(gè)分段籠里，前三天只允許嗅覺(jué)接觸無(wú)身體接觸，3天后放一起交配，次日早上通過(guò)陰道栓檢查雌鼠是否成功受孕，成功受孕者入組；

步驟2：孕期感染：確定懷孕后第9天尾靜脈注射10mg/kg的聚肌胞苷酸(PolyI:C)作為模型組或等體積生理鹽水作為對(duì)照組，模型組和對(duì)照組各隨機(jī)選取3只，在注射3小時(shí)后處死，檢測(cè)孕鼠外周血血清IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白水平，通過(guò)免疫激活狀態(tài)確定注射效果，其余孕鼠繼續(xù)飼養(yǎng)至產(chǎn)下子鼠；

步驟3：行為學(xué)檢測(cè)：將12-15只仔鼠于40天、56天采用小動(dòng)物行為采集和分析系統(tǒng)進(jìn)行Y迷宮、前脈沖抑制實(shí)驗(yàn)，分別分析大鼠的學(xué)習(xí)記憶狀態(tài)、感覺(jué)門(mén)控作用，比較兩組動(dòng)物隨年齡增長(zhǎng)在行為上的差異；

步驟4：對(duì)孕期感染子代大鼠模型進(jìn)行腦組織轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及熒光定量PCR分析；

步驟5：對(duì)孕期感染子代大鼠模型外周血單核細(xì)胞中HDAC5水平進(jìn)行驗(yàn)證。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HDAC5作為孕期感染子代大鼠模型外周標(biāo)志物的方法，其特征在于：步驟2中ELISA檢測(cè)孕鼠血漿IL-6、IL-1β和TNF-α的表達(dá)水平，當(dāng)結(jié)果顯示模型組孕鼠血漿炎癥因子水平相比于對(duì)照組顯著升高，則提示孕期免疫激活。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HDAC5作為孕期感染子代大鼠模型外周標(biāo)志物的方法，其特征在于：步驟3中行為學(xué)檢測(cè)時(shí)間控制在8:00-18:00之間，房間內(nèi)控制適宜的溫度、濕度及照明。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HDAC5作為孕期感染子代大鼠模型外周標(biāo)志物的方法，其特征在于：步驟4中將孕期感染子代大鼠模型40天子代前額葉皮質(zhì)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析HDAC5轉(zhuǎn)錄水平，并將測(cè)序結(jié)果通過(guò)熒光定量PCR進(jìn)一步驗(yàn)證。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HDAC5作為孕期感染子代大鼠模型外周標(biāo)志物的方法，其特征在于：收集孕期感染大鼠模型外周血樣，分離單核淋巴細(xì)胞，提取RNA，定量分析HDCA5表達(dá)水平。