[發明專利]鮮地黃中艾里莫酚烷型地黃倍半萜A和地黃倍半萜B的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202011365589.7
• 申請日: 2020-11-28
• 公開（公告）號: CN112409152B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發明（設計）人: 劉晏靈;馮衛生;曹彥剛;闞玉璇;任英杰;王夢娜;鄭曉珂
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07C45/79
• 分類號: C07C45/79;C07C49/733;A61P13/12
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種鮮地黃中艾里莫酚烷型地黃倍半萜A和地黃倍半萜B的制備方法，其特征在于，所述的倍半萜類化合物地黃倍半萜A和地黃倍半萜B分子結構式為：

制備方法包括以下步驟：

(1)、制備粗提取物，方法是，將鮮地黃切碎，每次用鮮地黃重量6-9倍量的體積濃度為70％的丙酮組織破碎提取3次，每次1-3min，合并丙酮提取液，減壓濃縮，得濃縮物，加濃縮物重量體積3-5倍量的蒸餾水混懸，依次加入與混懸液等體積的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯，減壓回收溶劑，得乙酸乙酯萃取部位的鮮地黃粗提取物浸膏；所述的重量體積是指固體物以g計，液體物以mL計；

(2)、硅膠柱色譜初步分離：乙酸乙酯萃取部位的鮮地黃粗提取物浸膏經硅膠柱色譜初步分離，用體積比為100:1、90:1、80:1、70:1、60:1、50:1、30:1、15:1、5:1的二氯甲烷-甲醇系統進行梯度洗脫，每個洗脫部位用量為柱體積的8倍，流速為15mL/min，每200mL為1個流份，分別收集二氯甲烷-甲醇體積比為100:1、50:1洗脫流份；

(3)、地黃倍半萜A的制備：將二氯甲烷-甲醇體積比為100:1洗脫流份經硅膠柱色譜進一步分離，用體積比為80:1、50:1、40:1、30:1、20:1、10:1的石油醚-乙酸乙酯系統進行梯度洗脫，每個梯度用量為柱體積的8倍，流速為6mL/min，每20mL為1個流份，收集石油醚-乙酸乙酯體積比為20:1洗脫流份；石油醚-乙酸乙酯體積比為20:1洗脫流份采用半制備液相進行純化，用體積比為32:68的甲醇-水進行洗脫10min，流速為2mL/min，得地黃倍半萜A；

(4)、地黃倍半萜B的制備：將二氯甲烷-甲醇體積比為50:1洗脫流份經MCI gel CHP-20柱色譜進一步分離，用體積比為0:100、10:90、20:80、30:70、50:50、70:30、90:10、100:0的甲醇-水系統進行梯度洗脫，每個梯度用量為柱體積的8倍，流速為10mL/min，每200mL為1個流份，收集甲醇-水體積比為20:80洗脫流份，甲醇-水體積比為20:80洗脫流份采用半制備液相進行純化，用體積比為23:77的甲醇-水進行洗脫10min，流速為2mL/min，得地黃倍半萜B。

2.根據權利要求1所述的鮮地黃中艾里莫酚烷型地黃倍半萜A和地黃倍半萜B的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)、制備粗提取物，方法是，將鮮地黃20kg切碎，每次用鮮地黃重量7倍量的體積濃度為70％的丙酮組織破碎提取3次，每次2min，合并丙酮提取液，減壓濃縮，得濃縮物，加濃縮物重量體積4倍量的蒸餾水混懸，依次加入與混懸液等體積的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯，減壓回收溶劑，得乙酸乙酯萃取部位的鮮地黃粗提取物浸膏；

(2)、硅膠柱色譜初步分離：乙酸乙酯萃取部位的鮮地黃粗提取物浸膏20.3g，用過100-200篩的硅膠20g拌樣，上含有過100-200篩的硅膠200g的硅膠柱，硅膠柱色譜初步分離，用體積比為100:1、90:1、80:1、70:1、60:1、50:1、30:1、15:1、5:1的二氯甲烷-甲醇系統進行梯度洗脫，每個洗脫部位用量為柱體積的8倍，流速為15mL/min，每200mL為1個流份，分別收集二氯甲烷-甲醇體積比為100:1、50:1洗脫流份；

(3)、地黃倍半萜A的制備：將二氯甲烷-甲醇體積比為100:1洗脫流份經硅膠柱色譜進一步分離，用體積比為80:1、50:1、40:1、30:1、20:1、10:1的石油醚-乙酸乙酯系統進行梯度洗脫，每個梯度用量為柱體積的8倍，流速為6mL/min，每20mL為1個流份，收集石油醚-乙酸乙酯體積比為20:1洗脫流份；石油醚-乙酸乙酯體積比為20:1洗脫流份采用半制備液相進行純化，用體積比為32:68的甲醇-水進行洗脫10min，流速為2mL/min，得地黃倍半萜A；

(4)、地黃倍半萜B的制備：將二氯甲烷-甲醇體積比為50:1洗脫流份經MCI gel CHP-20柱色譜進一步分離，用體積比為0:100、10:90、20:80、30:70、50:50、70:30、90:10、100:0的甲醇-水系統進行梯度洗脫，每個梯度用量為柱體積的8倍，流速為10mL/min，每200mL為1個流份，收集甲醇-水體積比為20:80洗脫流份，甲醇-水體積比為20:80洗脫流份采用半制備液相進行純化，用體積比為23:77的甲醇-水進行洗脫10min，流速為2mL/min，得地黃倍半萜B。