[發明專利]一株多粘類芽孢桿菌及其在梨樹病害防治中的應用

有效

• 申請號: 202011364270.2
• 申請日: 2020-11-27
• 公開（公告）號: CN112481160B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 孫偉波;劉鳳權;趙延存;李朝輝;湯寶
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/25;A01P3/00;C12R1/01
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 朱欣欣

本發明公開了一株多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）FX1及其應用，所述菌株已于2020年9月18日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC NO.20680；多粘類芽孢桿菌屬于我國第一級免做安全鑒定的菌種；菌株FX1及其生防菌劑對梨樹上的主要病原真菌具有較強的抑制活性，室內能抑制炭疽病斑的擴展，在田間也可抑制炭疽病、輪紋病、黑斑病、腐爛病的發生，對枝干上的腐爛病也有促進愈合作用；利用本菌株及其制劑能夠減少田間化學農藥的使用，保證了生態環境安全和果品質量安全，具有良好的社會和經濟效益，應用前景廣闊。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一株多粘類芽孢桿菌及其在梨樹病害防治中的應用。

背景技術

梨是世界性主要水果之一。近幾年我國梨樹的栽培面積在90萬公頃以上，產量穩定在1600萬噸左右，均占世界的三分之二以上，梨產業的健康發展對我國甚至世界水果行業的發展至關重要。病害是限制梨產業健康發展的重要因素之一，我國梨樹以炭疽病、輪紋病、腐爛病、黑星病等真菌病害為害為主。炭疽病為害葉片果實，2008年在梨果重要產地安徽省碭山縣大爆發，病果率高達70%以上，果農損失慘重。近年來炭疽病造成南方梨產區發生早期落葉現象，嚴重影響梨樹翌年的開花結果，炭疽病已成為我國梨產區重點防治對象。輪紋病為害枝干、葉片和果實，發生嚴重時枝干發病率達100%，病果率可達30％～50％，貯藏1個月后幾乎全部爛掉。腐爛病為害枝干，具有發病率高、發生區域廣、難以控制的特點，發病嚴重的梨園，樹體病疤累累、枝干殘缺不全，甚至造成大量死樹或毀園。

我國農作物病害防治長期以噴施化學藥劑為主，化學農藥的長期使用使病原菌產生抗性，導致用藥量持續加大，防效逐年降低，給生態環境和農產品質量安全帶來嚴重負面影響。生物防治利用有益微生物控制病原微生物，對環境安全無污染，在綠色防控中發揮重要作用。目前除了黑星病外，我國梨樹上登記的防治藥劑極少，尤其生防微生物還未有登記。持續開發、挖掘高效生防微生物資源對保護環境和農業安全健康生產意義重大。

多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）屬于我國第一級免做安全鑒定的菌種，是Ash等人于1994年從原來的芽孢桿菌屬中重新劃分歸類的菌屬，也是重要的植物根際促生菌。目前國內登記了13個多粘類芽孢桿菌的母藥和殺菌劑產品，在大田作物和果蔬上廣泛使用，可防治小麥赤霉病、水稻紋枯病、黃瓜角斑病、西瓜炭疽病、番茄青枯病等，還未在梨上登記使用。

本發明以梨樹主要真菌病害為靶標，從生防微生物中篩選到具有較強拮抗活性的多粘類芽孢桿菌，初步制備了生防菌劑進行應用，為果樹病害的生物防治提供新的資源。

發明內容

本發明的目的是提供一株具有廣譜抗菌效果的多粘類芽孢桿菌，該菌株對多種梨樹病原真菌表現顯著的拮抗效果，可彌補目前公開的專利中對于梨樹病害生物防治的不足，在生物農藥技術領域具有廣泛的應用前景。

本發明實現的技術步驟：

采用稀釋涂布分離法從果樹根際土壤中分離篩選獲得生防菌株FX1，該菌株在固體平板上對梨炭疽病菌、輪紋病菌、腐爛病菌和黑斑病菌均表現較強的拮抗效果。采用菌落菌體形態觀察、生理生化指標、16S和gyrB基因序列測定等方法，鑒定FX1為多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）FX1。菌株于2020年9月18日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心（簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101），保藏編號為CGMCC NO. 20680，其序列如SEQ ID NO:1所示。

所述菌株在NA培養基上的菌落特征：表面光滑無褶皺，乳白色，不透明狀，菌體呈桿狀，革蘭氏染色呈陰性，可產芽孢。

本發明所述的多粘類芽孢桿菌的應用，以該菌株為基礎制備成生防菌劑，用于但不僅限于防治梨炭疽病、梨輪紋病、梨黑斑病、梨腐爛病等真菌病害。