[發明專利]miR-10527-5p的檢測試劑在制備食管癌檢測試劑盒中的應用及檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202011362872.4
• 申請日: 2020-11-28
• 公開（公告）號: CN112458172B
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發明（設計）人: 趙小剛;肖兆華;李佩蔚;田忠獻;姜寧;周潔;羅鈞文
• 申請（專利權）人: 山東大學第二醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 劉文容

本發明涉及miR?10527?5p的檢測試劑在制備食管癌檢測試劑盒中的應用及檢測試劑盒，本發明首次揭示了血漿外泌體miR?10527?5p與食管癌發生發展、淋巴結轉移密切相關，在食管癌、淋巴結轉移患者中顯著降低且具有統計學意義。基于此，本發明將miR?10527?5p的檢測試劑應用于制備食管癌的檢測試劑盒，制備得到的食管癌檢測試劑盒可以簡便快捷、無創、特異性高的應用于食管癌早期診斷及預警淋巴結轉移，同時可用于指導食管癌患者術前新輔助化療，具有重要的臨床意義及推廣價值。

技術領域

本發明涉及miR-10527-5p的檢測試劑在制備食管癌檢測試劑盒中的應用及檢測試劑盒，屬于醫療衛生技術領域。

背景技術

食管癌作為消化道常見的惡性腫瘤之一，其發病率在全球范圍內位居所有惡性腫瘤的第8位，死亡率位居第6位。據2013年世界衛生組織統計，在全球范圍內，每年約有442000例患者診斷為食管癌，約有440000例患者因食管癌而死亡。近年來，盡管食管癌診療技術得到明顯提升，其預后仍然較差，5年總體生存率僅為20％左右。淋巴結轉移作為食管癌患者預后的獨立危險因素，是預后不佳的主要原因之一。研究表明，轉移性淋巴結數目與食管癌患者不良預后密切相關。0，0-2，≥3個淋巴結陽性患者的5年生存率分別為59.8％，33.4％及9.4％。目前判斷淋巴結轉移的主要方法為影像學檢查，而一些患者術前CT檢查無明顯腫大的淋巴結，術后病理卻證實為淋巴結陽性。因此，目前迫切的需要一種較為敏感的標志物，為預測食管癌患者淋巴結轉移提供線索和依據，進而指導術前新輔助化療，以促進食管癌患者的個體化治療，這對于改善患者預后，提高患者生存質量具有重要意義。

外泌體(exosomes)是細胞在生理或病理條件下釋放到細胞外的直徑在40-150nm的雙層囊泡結構，由細胞膜內陷后通過一系列復雜的機制形成多囊泡小體，通過與細胞膜融合，釋放外泌體至細胞外。外泌體可攜帶一系列生物活性物質，如脂質、蛋白質和核酸(microRNA，CicroRNA及LncRNA)等。研究表明多種腫瘤細胞如：食管癌、肺癌、甲狀腺癌、乳腺癌、胃癌細胞等均可分泌外泌體，并可通過不同分子機制影響腫瘤化療耐藥、腫瘤免疫、血管生成及遷移侵襲等過程，成為近年來腫瘤研究的熱點。外泌體幾乎在所有體液，如血液、尿液、唾液、母乳、精液、前列腺液、腦脊液、羊水和胸腔積液等中均有分布，且具有較高的組織特異性和穩定性，可用于腫瘤無創性檢查。

microRNA是近幾年來研究的熱點，它是一類短鏈內源性非編碼RNA，長約17-24個堿基，數量約占基因組的1％，其可通過與靶基因的3'-UTR區域完全或不完全配對，導致mRNA降解或抑制其翻譯，進而調控細胞的分化、增殖、凋亡等病理生理過程，發揮其促癌或抑癌基因的作用。相對于游離miRNA而言，血漿外泌體中miRNA由于有外泌體雙層脂膜的保護，可避免被RNA酶降解從而保持穩定性，進而更為有效地發揮遠距離信號傳遞功能，為腫瘤遠處轉移提供條件。因此，發現特異性高的血漿外泌體microRNA，并應用于食管癌的早期診斷及淋巴結轉移的判斷，對食管癌的早期篩查、個體化治療必將起到巨大的推動作用。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明提供了miR-10527-5p的檢測試劑在制備食管癌檢測試劑盒中的應用及檢測試劑盒，本發明首次揭示了miR-10527-5p的表達水平在食管癌患者和伴有淋巴結轉移的食管癌患者血漿外泌體中顯著降低，以miR-10527-5p的檢測試劑制備得到的食管癌檢測試劑盒可以簡便快捷、無創、特異性高的用于食管癌的早期診斷及預警淋巴結轉移。

本發明技術方案如下：

miR-10527-5p的檢測試劑在制備食管癌檢測試劑盒中的應用。

根據本發明優選的，所述miR-10527-5p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

根據本發明優選的，所述食管癌為食管鱗癌。

根據本發明優選的，所述食管癌檢測試劑盒為實時熒光定量PCR檢測試劑盒。