[發明專利]LncRNA18q21.2在作為診斷食管癌的標志物中的應用、引物對和試劑盒

有效

• 申請號: 202011347359.8
• 申請日: 2020-11-26
• 公開（公告）號: CN112359113B
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 郭明洲;楊偉麗;張美英;蘇小茉
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍總醫院第一醫學中心
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 呂紀濤

本發明提供了LncRNA18q21.2在作為診斷食管癌的標志物中的應用、引物對和試劑盒，屬于基因工程技術領域，所述LncRNA18q21.2可作為診斷食管癌的標志物。利用本發明提供的試劑盒和引物對食管癌組織中LncRNA18q21.2的表達的檢測可作為食管癌診斷、療效觀察、預后判斷、病灶殘留以及復發檢測等的有效手段，而且操作簡便、穩定性好、靈敏度高，具有深遠的臨床意義和推廣性。

技術領域

本發明屬于基因工程技術領域，尤其涉及LncRNA18q21.2在作為診斷食管癌的標志物中的應用、引物對和試劑盒。

背景技術

食管癌是全球第八位常見惡性腫瘤，在全球致死癌癥中為第六位，食管鱗癌是食管癌中最常見的類型，食管鱗癌的發病機理同種族、基因和飲食相關。同其它腫瘤一樣，食管鱗癌的生理特點也包含表觀遺傳的異常和生理功能信號通路的失控。化療、放化療和手術切除是食管鱗癌目前的主要治療方法。然而食管鱗癌的5年生存率任然很低(15％)。因此，發現食管鱗癌的早期診斷和治療的有效方法具有十分重要的意義。

歷史上人類基因組的許多非編碼蛋白質部分都被視為“垃圾”DNA。但是，在過去的十年中，隨著諸如二代測序等高通量技術的發展，人們對非編碼基因組進行了深入研究。令人驚訝的是，此類研究表明盡管在某些條件下所有核苷酸中的大多數均可被轉錄，但只有不到2％的人類基因組編碼蛋白質。在各種類型的非蛋白質編碼轉錄本中，長鏈非編碼RNA(long non-codingRNA,lncRNA)吸引了越來越多的關注。lncRNA被定義為不編碼蛋白質且長度大于200個核苷酸的轉錄本。LncRNA根據其轉錄位點可分為基因間轉錄本，增強子RNA(eRNA)以及與其他基因重疊的正義或反義轉錄本。lncRNA通過轉錄調節、剪接調控因子、轉錄后加工、染色質重塑調節或作為增強子、MiRNA的分子“誘餌”調控蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA之間的相互作用。LncRNA通過這些方式影響細胞增殖、遷移、凋亡、侵襲、致瘤性、細胞周期和轉移等。

隨著高通量測序技術的發展和RNA芯片技術的成熟，越來越多的lncRNA被發現。雖然大部分lncRNA的功能并不明確，但有一些與腫瘤相關的LncRNA研究已較成熟，比如MALAT1，PANDA，PCAT-1，PCA3等，還有一些正在研究中，可作為腫瘤的診斷或治療新策略。例如SAMMSON特異表達于90％以上的人類惡性(而非良性)黑色素瘤臨床樣本中，可作為惡性黑色素瘤的一個生物標記物；因為SAMSSON基因不表達于良性黑色素瘤中，它的出現有可能是開發出新診斷工具、顯著改善黑色素瘤預后的一個關鍵因素。HULC(the hepatocellularcarcinoma(HCC)upregulated lncRNA)在HCC患者中高表達，可以通過常規PCR方法在血液中檢測出來。已開發出的質粒BC-819(DTA-H19)利用lncRNA H19的腫瘤特異性表達，在H19啟動子的調控下攜帶白喉毒素A亞基的基因。腫瘤內注射可誘導腫瘤中白喉毒素的高水平表達，從而在試驗中降低了多種人類腫瘤的大小。但目前與食管癌發生發展相關的lncRNA研究尚少，lncRNA在食管癌中的作用機制以及臨床價值尚有待深入研究。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供LncRNA18q21.2在作為診斷食管癌的標志物中的應用、引物對和試劑盒，本發明提供的LncRNA18q21.2能夠作為診斷食管癌的標志物。

為了實現上述發明目的，本發明提供了以下技術方案：

本發明提供了LncRNA18q21.2在作為診斷食管癌的標志物中的應用。

本發明還提供了檢測上述技術方案所述的LncRNA18q21.2的RT-PCR引物對，所述RT-PCR引物對的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQID No.2所示。