[發(fā)明專利]一種生物法制造PQQ的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011339716.6
• 申請日: 2020-11-25
• 公開（公告）號: CN112375792B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鐘迎東;張海軍;馬貴軍;王國強(qiáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古拜克生物有限公司
• 主分類號: C12P17/18
• 分類號: C12P17/18;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 北京精金石知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11470
• 代理人: 尉月麗

1.一種生物法制造PQQ的方法，其特征在于：包括以下步驟：

將普通生絲微菌ATCC27499活化后接種到種子培養(yǎng)基，得到種子液后，將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)得到PQQ；在發(fā)酵培養(yǎng)過程中補(bǔ)加發(fā)酵補(bǔ)加劑；

所述發(fā)酵培養(yǎng)基由以下組分組成：(NH₄)₂SO₄、Na₂HPO₄、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、CaCl₂·2H₂O、MnCl₂·5H₂O、ZnSO₄·7H₂O、CuSO₄·5H₂O、KI、NaCl、香菇多糖、枸杞多糖、消泡劑、無水甲醇和余量水；

所述補(bǔ)加的過程包括：開始發(fā)酵90-120h進(jìn)行第一次補(bǔ)加，發(fā)酵130-135h進(jìn)行第二次補(bǔ)加；所述發(fā)酵補(bǔ)加劑由甲醇、甘油、枸杞多糖、香菇多糖和水溶性大豆異黃酮組成；所述第一次補(bǔ)加中，發(fā)酵補(bǔ)加劑的補(bǔ)加量分別為：1-2mL/L甲醇、1-2mL/L甘油、0.1-0.2g/L枸杞多糖、0.2-0.3g/L香菇多糖和0.2-0.3g/L水溶性大豆異黃酮；所述第二次補(bǔ)加中，發(fā)酵補(bǔ)加劑的補(bǔ)加量分別為：0.5-1mL/L甲醇、0.5-1mL/L甘油、0.1g/L枸杞多糖、0.1g/L香菇多糖和0.1g/L水溶性大豆異黃酮。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基由以下組分組成：(NH₄)₂SO₄ 2-3g/L、Na₂HPO₄ 2-3g/L、KH₂PO₄ 1-2g/L、MgSO₄·7H₂O 0.1-0.3g/L、CaCl₂·2H₂O0.02-0.04g/L、MnCl₂·5H₂O 0.002-0.006g/L、ZnSO₄·7H₂O 0.002-0.006g/L、CuSO₄·5H₂O0.0002-0.0006g/L、KI 0.01-0.02g/L、NaCl 0.5-1g/L、香菇多糖0.2-0.5g/L、枸杞多糖0.3-0.7g/L、消泡劑0.2-0.5g/L、無水甲醇2-5g/L和余量水。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述種子培養(yǎng)基包括：(NH₄)₂SO₄、Na₂HPO₄、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、CaCl₂·2H₂O、MnCl₂·5H₂O、ZnSO₄·7H₂O、CuSO₄·5H₂O、無水甲醇和余量水。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基的接種量為發(fā)酵培養(yǎng)基總體積的1-10%。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件為：25-37℃，150rpm條件下震蕩培養(yǎng)24h，pH=7-7.5。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件為：25-37℃，150rpm條件下發(fā)酵6-8天。