[發明專利]一株乳酸乳球菌及其應用

在審

• 申請號: 202011337808.0
• 申請日: 2020-11-25
• 公開（公告）號: CN112375712A
• 公開（公告）日: 2021-02-19
• 發明（設計）人: 鄧先余;楊雪嬌;周晨煜;張棋麟;林連兵
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/18;A23K50/80;A61K35/744;A61P37/04;A61P31/00;C12R1/46
• 代理公司: 昆明同聚專利代理有限公司 53214
• 代理人: 蘇蕓蕓

本發明公開了一株乳酸乳球菌KUST48，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC NO.20699；將本發明菌株應用在對無乳鏈球菌感染的斑馬魚的治療中，實驗結果顯示，該菌株顯著能抑制無乳鏈球菌在斑馬魚腸道內的繁殖，降低無乳鏈球菌感染后斑馬魚的死亡率；本發明旨在替代抗生素，克服抗生素過度使用、藥物殘留、耐藥性、食品安全以及環境污染等一系列缺陷，改善水產動物的免疫功能，增強其抗病功能，減少藥物的使用量，推動水產養殖業綠色、生態發展。

技術領域

本發明涉及一株乳酸乳球菌及其在水產養殖中的應用，屬于水產養殖技術及病害防控技術領域。

背景技術

近幾十年來，由于抗生素的濫用，造成抗生素的藥效下降，據報道抗生素會破壞機體腸道內正常菌群的平衡，導致病原菌的易感性。同時抗生素會在體內殘留，造成過敏及生態污染等問題。益生菌作為抗生素的替代，能避免抗生素的副作用，同時有助于宿主吸收營養，改善生存環境，增強宿主對疾病的快速響應，提高機體的免疫能力。目前，隨著我國水產業的快速發展，益生菌也被用于魚類免疫、疾病治療和水質改善。

乳酸菌是人與動物胃腸道常見的有益菌，乳酸菌作為重要的益生菌已經廣泛應用于食品、飲料和微生態制劑中，被公認為是安全級微生物。是近年發展起來的新型綠色添加劑，具有改善動物消化道的有益菌群，抑制或者殺死有害菌群，提高動物健康水平，促進動物生長發育及提高飼料的利用率等。此外，還具有無殘留、無毒副作用，可改善養殖生態環境，達到生態防治的目的，使養殖生產良性發展，取得更好的生態效益和經濟效益。

無乳鏈球菌屬于B群鏈球菌，是兼性厭氧的革蘭氏陽性菌，是水產類炎癥和哺乳動物乳腺炎癥的病原菌之一，魚源無乳鏈球菌的基因表達顯示其能夠更好的適應魚類宿主，可感染30種魚類，使魚類的死亡率高達50%以上。無乳鏈球菌能在巨噬細胞內存活，進入血腦屏障，從而進入血液和中央神經系統，這樣就能快速進入其它器官和組織，使機體出現細菌性敗血癥狀。該病主要集中在春、夏和秋季，出現在100g以上的幼魚和成魚之間，感染性強，感染率在20%~30%，給魚類養殖和生產造成嚴重的損失。但目前在水產養殖中增強免疫、抗病毒和抗寄生蟲等方面的研究極少。

發明內容

本發明提供了一株乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）KUST48，該乳酸乳球菌KUST48是從健康的吉富羅非魚腸道分離得到，該菌種已于2020年9月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC），地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏號為CGMCC NO.20699。

本發明另一目的是將上述菌種應用在制備增強水產動物免疫能力制劑中，或應用在制備增強水產動物抗病能力制劑中。

本發明所述的制劑是將乳酸乳球菌KUST48作為有效活性成分，或與其他其他活性成分復配制備增強免疫力或抗病藥劑、飼料添加劑或飼料；還可以加入一種或多種病害防治制劑可接受的輔料，所述輔料包括藥學領域常規的填充劑、稀釋劑、粘合劑、賦形劑、吸收促進劑、填充劑、表面活性劑和穩定劑等；或者飼料制備中常用輔料。

所述抗病能力是指抵抗無乳鏈球菌的能力。

本發明的優點在于：采用乳酸乳球菌替代抗生素，克服抗生素過度使用、藥物殘留、耐藥性、食品安全以及環境污染等一系列缺陷，改善水產動物的免疫功能，增強其抗病功能，減少藥物的使用量，推動水產養殖業綠色、生態發展。

附圖說明

圖1為乳酸乳球菌菌落形態圖；

圖2為膽鹽耐受性實驗結果示意圖；

圖3 為人工胃液耐受性實驗結果示意圖；

圖4 為人工腸液耐受性實驗結果示意圖；

圖5為屬水平的物種豐度分析結果；