[發明專利]一種提高秈稻成熟胚愈傷組織誘導的前處理方法有效
| 申請號: | 202011336591.1 | 申請日: | 2020-11-25 |
| 公開(公告)號: | CN112400693B | 公開(公告)日: | 2022-02-18 |
| 發明(設計)人: | 張維林;楊玲;金海芳;李雙香 | 申請(專利權)人: | 浙江師范大學 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00;A01C1/08 |
| 代理公司: | 成都方圓聿聯專利代理事務所(普通合伙) 51241 | 代理人: | 宋紅賓 |
| 地址: | 321004 *** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 提高 秈稻 成熟 胚愈傷 組織 誘導 處理 方法 | ||
1.一種提高秈稻成熟胚愈傷組織誘導的前處理方法,包括:
秈稻成熟胚去殼;
前處理試劑配制;
成熟胚前處理;以及
成熟胚消毒;
其中:成熟胚前處理為:去殼的秈稻成熟胚清水洗凈,再以無菌水漂洗3-5次,隨后采用質量濃度0.5%-1%的30%的三氯異氰尿酸溶液于25~37℃下浸泡8-12h,結束后以無菌水漂洗3-5次,使用無菌濾紙吸干種子。
2.根據權利要求1所述的前處理方法,其中:
所述前處理試劑由30%的三氯異氰尿酸復合物和滅菌水,按照質量比配制成質量濃度為0.5%-1%的三氯異氰尿酸溶液。
3.根據權利要求1所述的前處理方法,其中:
所述成熟胚消毒包括:
75%酒精處理無菌濾紙吸干的水稻種子2min,無菌水漂洗2-3次;
5-10%的次氯酸鈉消毒15-20min,或0.15%的氯化汞消毒12min,無菌水漂洗2-3次;
無菌濾紙吸干種子,接種至愈傷組織誘導培養基。
4.根據權利要求3所述的前處理方法,其中:
所述愈傷組織誘導培養基由如下方法制得:
向NB基本培養基中加入4mg/L的2,4-D、30g/L的蔗糖、2.7g/L的植物凝膠phytagel,并調節pH值至5.8。
5.根據權利要求1所述的前處理方法,其中:
前處理結束后,成熟胚消毒,每誘導培養基平皿接種10-12粒種子,每處理接種3皿,接種21天,統計不同濃度浸泡不同時間成熟胚的出愈率并稱量愈傷組織的重量 。
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