[發明專利]一種高山杜鵑種子外植體的消毒方法

在審

• 申請號: 202011334516.1
• 申請日: 2020-11-25
• 公開（公告）號: CN112450071A
• 公開（公告）日: 2021-03-09
• 發明（設計）人: 李慧娥
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 河南省古格知識產權代理事務所(普通合伙) 41197
• 代理人: 陳娟

1.一種高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，包括：在高山杜鵑種子中加入硼酸浸泡24小時；

然后在所述浸泡過硼酸的高山杜鵑種子中加入乙醇消毒，使用移液器吹打乙醇液體使得所述浸泡過硼酸的高山杜鵑種子均勻地懸浮在所述乙醇中，20秒后，使用移液器吸出所述乙醇，所述移液器吸頭的容量大于或等于所述加入的乙醇體積；

將無菌去離子水吹打在所述使用乙醇消毒過的高山杜鵑種子上；

然后，吸出所述無菌去離子水，在所述經無菌去離子水吹打的高山杜鵑種子中加入次氯酸鈉溶液消毒，使用移液器吹打所述次氯酸鈉液體使得所述經無菌去離子水吹打的高山杜鵑種子均勻懸浮在所述次氯酸鈉液體中，8分鐘45秒-9分鐘15秒后，使用移液器吸出所述次氯酸鈉液體，所述移液器吸頭的容量大于或等于所述加入的次氯酸鈉溶液；

然后，再次將無菌去離子水吹打在所述使用次氯酸鈉溶液消毒過的高山杜鵑種子上，完成消毒。

2.根據權利要求1所述的高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，所述高山杜鵑種子完成消毒后，使用移液器將所述完成消毒的高山杜鵑種子吸出放在濾紙上，用藥匙將種子均勻撒在培養基內。

3.根據權利要求2所述的高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，所述培養基為由1/4MS、KT1.0mg/L、25g/L蔗糖和8g/L瓊脂制成，PH為5.8。

4.根據權利要求1所述的高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，所述硼酸的濃度為0.5%。

5.根據權利要求1所述的高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，所述乙醇的濃度為70%。

6.根據權利要求1所述的高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，所述次氯酸鈉溶液的濃度為5%。

7.根據權利要求6所述的高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，所述在所述經無菌去離子水吹打的高山杜鵑種子中加入次氯酸鈉溶液消毒的時間為9分鐘。

8.根據權利要求1所述的高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，所述無菌去離子水是高壓滅菌30分鐘后的去離子水。

9.根據權利要求1所述的高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，使用乙醇消毒時，所述高山杜鵑種子所占體積是所述乙醇體積的二分之一。

10.根據權利要求9所述的高山杜鵑種子外植體的消毒方法，其特征在于，使用次氯酸鈉溶液消毒時，所述高山杜鵑種子所占體積是所述次氯酸鈉溶液體積的二分之一。