[發明專利]一種具有睡眠改善作用的酪蛋白肽及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202011331131.X
• 申請日: 2020-11-24
• 公開（公告）號: CN112409470A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 張九勛;張學軍;田明展;張西平;魏瑋;王慧娟;王芳;谷帥
• 申請（專利權）人: 中食都慶（山東）生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;C12P21/06;A61K38/01;A61K38/17;A61P25/20
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 薛紅凡

1.一種具有睡眠改善作用的酪蛋白肽T1，其特征在于，所述酪蛋白肽T1的氨基酸序列為如SEQ ID NO：1所示的KLPPVGPY。

2.一種具有睡眠改善作用的酪蛋白肽T2，其特征在于，所述酪蛋白肽T2的氨基酸序列為如SEQ ID NO：2所示的APIASLLPPY。

3.一種具有睡眠改善作用的酪蛋白肽組合物，包括權利要求1所述酪蛋白肽T1和權利要求2所述酪蛋白肽T2；

所述酪蛋白肽T1和酪蛋白肽T2的摩爾比為(1～10):(1～10)。

4.權利要求1所述具有睡眠改善作用的酪蛋白肽T1或權利要求2所述具有睡眠改善作用的酪蛋白肽T2的提取分離方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將酪蛋白溶液經勻漿和均質，得到性質穩定的勻漿液；

2)將所述勻漿液在48～52℃條件下攪拌1～1.5h，調節pH值至7.0～7.4，得到預處理勻漿液；

3)將所述預處理勻漿液依次經胰蛋白酶和木瓜蛋白酶作用下酶解，滅酶后，得到酶解液；

4)所述酶解液去除色素后，依次過30000Da陶瓷膜和1KD有機膜，收集膜下物，得到酪蛋白肽混合物；

5)用Sephadex G-50層析柱對所述酪蛋白肽混合物進行粗分離純化，收集出峰時間為12～15min的組分；

6)采用納升級液相色譜-Q EXACTIVE質譜聯用系統對所述組分進行分析，得到的兩種單鏈多肽分別為酪蛋白肽T1和酪蛋白肽T2。

5.根據權利要求4所述提取分離方法，其特征在于，步驟1)中所述勻漿液中顆粒粒徑為0.10～0.15mm；

所述均質的壓力為25兆帕，所述均質的時間為2h。

6.根據權利要求4所述提取分離方法，其特征在于，步驟3)中胰蛋白酶在勻漿液中的質量濃度為0.5％～0.7％，所述胰蛋白酶的酶解時間為1～1.2h；

所述木瓜蛋白酶在勻漿液中的質量濃度為0.2％～0.4％，所述木瓜蛋白酶的酶解時間為4～4.5h。