[發明專利]一種高效轉化維生素D3為其活性形式的菌株及其應用

有效

• 申請號: 202011330526.8
• 申請日: 2020-11-24
• 公開（公告）號: CN112322549B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 許正宏;李會;史勁松;何鵬;張曉梅;龔勁松
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/02;C12N1/02;C12Q1/04;C12R1/11
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

1.一種巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)H-1，其特征在于：于2020年9月4日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏編號為CGMCC NO.20362。

2.一種維生素D3的體外微生物轉化方法，其特征在于：使用如權利要求1所述的巨大芽孢桿菌( Bacillus megaterium)H-1。

3.根據權利要求2所述的維生素D3的體外微生物轉化方法，其特征在于：轉化維生素D3為25-OH-VD3和1α，25-diOH-VD3。

4.根據權利要求2或3所述的維生素D3的體外微生物轉化方法，其特征在于：具體方法為：制備巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)H-1的菌株種子液，接入轉化培養基培養，得到的菌液中加入維生素D3，經生物轉化后得轉化液。

5.根據權利要求4所述的維生素D3的體外微生物轉化方法，其特征在于：菌株種子液使用的種子培養基成分及配比為：葡萄糖5-20g/L，胰蛋白胨5-20g/L，酵母提取物5-15g/L，玉米漿5-15g/L，NaCl 5-15g/L，(NH4)₂SO₄ 1-10g/L，KH₂PO₄ 1-10g/L，MgSO₄ 1-10g/L，CaCO₃1-10g/L；生物轉化使用的轉化培養基的成分及配比為：葡萄糖5-20g/L，胰蛋白胨5-20g/L，酵母提取物5-15g/L，玉米漿5-15g/L，NaCl 5-15g/L，(NH4)₂SO₄ 1-10g/L，KH₂PO₄ 1-10g/L，MgSO₄ 1-10g/L，CaCO₃ 1-10g/L，羥丙基-β-環糊精10-100g/L。

6.根據權利要求4所述的維生素D3的體外微生物轉化方法，其特征在于：加入維生素D3的時間節點為菌株在培養基中生長12-24h后。

7.根據權利要求4所述的維生素D3的體外微生物轉化方法，其特征在于：維生素D3共10-250mg溶于250μL乙醇后，再投入菌液中。

8.根據權利要求4所述的維生素D3的體外微生物轉化方法，其特征在于：投入菌體發酵液中的維生素D3的終濃度為0.2-5g/L。