[發明專利]一株高地芽孢桿菌及其在防控雪茄發酵霉變中應用

有效

• 申請號: 202011326947.3
• 申請日: 2020-11-24
• 公開（公告）號: CN112342169B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發明（設計）人: 顧金剛;劉好寶;楊明川;馬聰聰;夏鑫鑫;張磊;羅澤華;蔡斌;辛玉華
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司海南省公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 魏少偉

本發明公開了一株高地芽孢桿菌及其在防控雪茄發酵霉變中應用。本發明公開的高地芽孢桿菌為高地芽孢桿菌(Bacillus altitudinis)YC?9，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC No.20884，該菌株可抑制真菌的生長，還可減少煙葉霉變，將該菌株與貝萊斯芽胞桿菌(Bacillus velezensis)ACCC02735組合在一起可以提高雪茄發酵外觀品質。說明，本發明的高地芽孢桿菌(Bacillus altitudinis)YC?9以及菌株組合可用于提高煙葉發酵過程中的品質。

技術領域

本發明涉及生物技術領域中，一株高地芽孢桿菌及其在防控雪茄發酵霉變中應用。

背景技術

煙葉中微生物種類和數量繁多，基本可分為有益微生物和有害微生物兩類，雪茄煙葉發酵過程中經過有益微生物、生物酶和化學元素的共同催化作用，可以使煙葉內在香氣質量得以充分的顯現和發揮，提高煙葉的使用價值，但真菌繁殖可導致煙葉利用率降低，破壞煙葉的物理性狀，使煙葉失去彈性后易破損，且產生霉味，失去使用價值。

調制和發酵是雪茄煙葉質量形成的關鍵環節，并且發酵是為了彌補雪茄栽培、采收及晾制上的不足，是獲得優質雪茄煙葉的關鍵。雪茄煙葉發酵是指在一定的溫度和濕度等條件下，促使煙葉理化特性和其微生物種群發生變化，引起煙葉香氣和內在品質明顯改善的加工過程。發酵可以使煙葉產生獨特的雪茄風味和芳香，并使煙葉色澤加深、顏色均勻一致，光澤油潤均勻，彈性和燃燒性增強，同時減少雪茄煙氣中的刺激性氣味和辣、苦澀等不良感覺，改善煙葉品質。雪茄煙葉發酵過程中經過微生物、生物酶和化學元素的共同催化作用，可以使煙葉內在香氣質量得以充分的顯現和發揮，提高煙葉的使用價值。煙葉發酵分為自然陳化和人工發酵兩種方式,自然陳化是提高煙葉香氣的傳統方法,具有人工發酵不可替代的優勢，但是自然陳化煙葉貯存周期長,占用倉庫面積大,生產成本高,國內煙草企業較難承受如此大的經濟壓力,因此多數制造商仍愿意采用人工發酵法處理煙葉。

Reid等人在1944年發現烤煙煙葉中的細菌種類主要為巨大芽孢桿菌，霉菌以青霉和曲霉為主。韓錦峰等認為芽孢桿菌和梭狀芽孢桿菌是發酵烤煙的優勢種群，并沒有酵母菌存在。王革等于2003年在國內首次報道，從自然發酵的煙葉上分離出了酵母菌，并指出酵母菌、光合細菌、固氮菌和生香產酸細菌也是煙葉發酵過程中的優勢菌。李寧等對雪茄煙葉表面微生物采用稀釋分離法進行分離鑒定，結果表明，人工發酵后雪茄煙葉表面微生物的數量急劇減少，細菌數量仍占絕對優勢，僅有少量真菌被分離出來，芽孢桿菌屬和青霉屬在發酵前后均處于優勢地位。張曉娟等在溫度40℃、相對濕度70％條件下對雪茄外包皮煙葉面微生物進行分離鑒定，結果表明細菌數量占絕對優勢，霉菌較少，未分離到酵母和放線菌。李躍鋒等研究發現引起煙葉霉變的微生物主要為球桔青霉、黃曲霉、球孢枝孢和米曲霉，屬有害微生物。

高地芽孢桿菌(Bacillus altitudinis)是一種生防菌，也是芽孢產生菌，能產堿性蛋白酶。近年來，國內外對高地芽孢桿菌產堿性蛋白酶方面的研究較多，主要的研究集中在方法、性質和純化等方面，但有關的產芽孢方面的研究較少。芽孢是有些細菌在生長發育后期細胞質高度脫水所形成的的圓形或橢圓形的休眠體。研究表明，芽孢具有耐高溫高壓、干燥、酸堿、有機溶劑等抗逆性，在醫藥、畜牧業等領域有重要作用，具有非常重要的研究與應用價值，但在工業發酵生產中，普遍存在芽孢生產不受控制、芽孢率低、芽孢數不高、生產成本高等的情況，給芽孢的生產造成了阻礙和困難，對工業生產效率和經濟造成了消極影響。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何防控煙葉霉變。

為解決上述技術問題，本發明首先提供了高地芽孢桿菌(Bacillus altitudinis)YC-9，該菌株在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCCNo.20884。

本發明還提供了一種菌劑(記為菌劑1)，該菌劑的活性成分為所述高地芽孢桿菌(Bacillus altitudinis)YC-9。