[發(fā)明專利]一種前列腺素E2的高收率分離純化方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011317658.7
• 申請日: 2020-11-23
• 公開（公告）號: CN112479962B
• 公開（公告）日: 2022-12-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王希;鄧杰;李建文
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州納微科技股份有限公司
• 主分類號: C07C405/00
• 分類號: C07C405/00
• 代理公司: 蘇州華博知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32232
• 代理人: 何蔚

本發(fā)明提供了一種高收率分離純化前列腺素E2的方法，包括以下步驟，將前列腺素粗品進(jìn)行溶解、過濾；將上述過濾后的溶液上樣到裝有均粒反相硅膠的層析柱中進(jìn)行層析；采用乙酸水溶液和有機溶劑作為流動相對目標(biāo)產(chǎn)物進(jìn)行洗脫；分段收集目的峰值的溶液，對符合要求的組份液進(jìn)行匯總。本發(fā)明采用單分散的UniSil C18或UniSil C8作為固定相，分離方法簡單，可規(guī)?；a(chǎn)，回收率高且穩(wěn)定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物純化領(lǐng)域，特別是一種高收率分離純化前列腺素E2的方法。

背景技術(shù)

前列腺素E2，也稱地諾前列酮，英文名稱簡寫為PGE2，前列腺素E2(PGE2)是一種重要的細(xì)胞生長和調(diào)節(jié)因子，是花生四烯酸環(huán)氧合酶代謝產(chǎn)物，為二十碳不飽和脂肪酸。PGE2可引起強烈子宮收縮，影響胎盤血液供應(yīng)和胎盤功能，而發(fā)生流產(chǎn)。收縮子宮平滑肌的機制，可能與前列腺素使子宮平滑肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣釋放增加有關(guān)。PGE2不同于催產(chǎn)素，它對各期妊娠子宮均有興奮作用，且比較溫和，其縮宮作用較PGE2α強10～40倍。PGE2對子宮頸有轉(zhuǎn)化及擴(kuò)張作用，可用于人流手術(shù)前擴(kuò)張宮頸。這可能是由于前列腺素刺激宮頸纖維細(xì)胞，是膠原纖維排列改變所致。PGE2可使支氣管平滑肌舒張，對下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞有升溫作用，用藥后體溫可升高1～2℃。

前列腺素E2英文名稱：prostaglandin E2；PGE2；Cerviprost；(Z)-7-((1R，2R，3R)-3-Hydroxy-2-((S，E)-3-hydroxyoct-l-en-l-yl)-5-oxocyclopentyl)hept-5-enoicacid；ProstaglandinE2；prostin；Prostaglandin E2；Propess；Prepidil；MCH(human，mouse，rat)；Cervidil；prostine2；l-pge2；Prostenon；Cervidil(R)

化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

目前國內(nèi)外專利、科研文獻(xiàn)等對前列腺素E2的報道多為生產(chǎn)方法及產(chǎn)品應(yīng)用專利，分離純化方法鮮有報道。CN111394289A主要是基因工程生產(chǎn)方法，其獲得的樣品純度極低，僅2.547％，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn)。因此有必要對前列腺素E2的分離、純化和制備做更進(jìn)一步的研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種高收率分離純化前列腺素E2的方法，僅需一步層析純化即可滿足前列腺素E2純度大于98.5％、收率大于99％的要求，純化收率高而穩(wěn)定，同時本發(fā)明分離方法簡單方便，可用于規(guī)模化生產(chǎn)，大大降低生產(chǎn)成本。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：一種前列腺素E2的高收率分離純化方法，包括以下步驟：1)將前列腺素E2粗提取物溶解并過濾；2)將上述過濾后的前列腺素E2溶液上樣到裝有反相硅膠微球的層析柱中進(jìn)行層析；3)采用酸性水溶液和有機溶劑作為流動相對前列腺素E2溶液進(jìn)行梯度洗脫；4)分段收集目的峰值的前列腺素E2溶液，對符合要求的組份液進(jìn)行匯總；

所述前列腺素E2的高收率分離純化方法，洗脫液中前列腺素E2的純度大于98.5％，收率大于99％。

優(yōu)選的，所述反相硅膠為單分散的、具有孔道結(jié)構(gòu)的微球。

優(yōu)選的，所述反相硅膠微球的型號是UniSil C18或UniSil C8。

優(yōu)選的，所述1)中前列腺素E2粗提取物溶解于酸性溶液中。

優(yōu)選的，所述3)中酸性水溶液為乙酸水溶液。

優(yōu)選的，所述3)中有機溶劑為甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、異丙醇。

優(yōu)選的，上樣前，對層析柱進(jìn)行平衡，先用高濃度所述有機溶劑進(jìn)行再生，后用濃度低于30％的所述有機溶劑進(jìn)行平衡。所述高濃度指濃度在30％-70％之間。