[發(fā)明專利]一種以多聚卟啉納米材料為載體的固定化酶及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011317169.1
• 申請(qǐng)日: 2020-11-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112391374B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 佟毅;李正強(qiáng);李義;耿旭;陶進(jìn);張闖;梁穎超;徐楊;武麗達(dá)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林中糧生化有限公司;吉林大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N11/089
• 分類號(hào): C12N11/089;C12N9/92;C12N9/04
• 代理公司: 吉林長(zhǎng)春新紀(jì)元專利代理有限責(zé)任公司 22100
• 代理人: 魏征驥

1.一種以多聚卟啉納米材料為載體的固定化酶，其特征在于，是由如下步驟制備得到的：

（1）將質(zhì)量之比為3:1的內(nèi)消旋-（4-羧基苯基）卟吩和氯氧化鋯溶解于質(zhì)量分?jǐn)?shù)1~3%的苯甲酸溶液中，于90℃反應(yīng)4~6h；然后用N,N-二甲基甲酰胺漂洗至納米卟啉顆粒表面殘余液體為中性，最后真空干燥得到多聚卟啉納米顆粒；

（2）將步驟（1）得到的多聚納米卟啉納米顆粒浸沒(méi)于質(zhì)量分?jǐn)?shù)2?.5~20%的交聯(lián)劑戊二醛溶液中，密封后置于20~40℃下反應(yīng)1~7小時(shí)，然后以10000G離心力離心；再依次用超純水及磷酸鹽緩沖液進(jìn)行洗滌，然后真空干燥，得到修飾后的多聚卟啉納米材料；

（3）將步驟（2）修飾后的多聚卟啉納米材料浸沒(méi)于質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.05~10%的酶溶液中，該修飾后的多聚卟啉納米材料與酶的質(zhì)量比為10~15:1，酶為葡萄糖異構(gòu)酶或葡萄糖氧化酶，然后15~40℃下交聯(lián)反應(yīng)0.5~3小時(shí)，然后以10000G~15000G離心力離心，離心產(chǎn)物用磷酸鹽緩沖液洗滌3~5次，真空干燥即得到以多聚卟啉納米材料為載體的固定化酶。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種以多聚卟啉納米材料為載體的固定化酶，其特征在于：步驟（2）中，交聯(lián)劑戊二醛溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2?.5~10%，反應(yīng)溫度為25~30℃，磷酸鹽緩沖液的pH=?6.0~8.0。

3.一種以多聚卟啉納米材料為載體的固定化酶的制備方法，其步驟如下：

（1）將質(zhì)量之比為3:1的內(nèi)消旋-（4-羧基苯基）卟吩和氯氧化鋯溶解于質(zhì)量分?jǐn)?shù)1~3%的苯甲酸溶液中，于90℃反應(yīng)4~6h；然后用N,N-二甲基甲酰胺漂洗至納米卟啉顆粒表面殘余液體為中性，最后真空干燥得到多聚卟啉納米顆粒；

（2）將步驟（1）得到的多聚納米卟啉納米顆粒浸沒(méi)于質(zhì)量分?jǐn)?shù)2?.5~20%的交聯(lián)劑戊二醛溶液中，密封后置于20~40℃下反應(yīng)1~7小時(shí)，然后以10000G離心力離心；再依次用超純水及磷酸鹽緩沖液進(jìn)行洗滌，然后真空干燥，得到修飾后的多聚卟啉納米材料；

（3）將步驟（2）修飾后的多聚卟啉納米材料浸沒(méi)于質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.05~10%的酶溶液中，該修飾后的多聚卟啉納米材料與酶的質(zhì)量比為10~15:1，酶為葡萄糖異構(gòu)酶或葡萄糖氧化酶，然后15~40℃下交聯(lián)反應(yīng)0.5~3小時(shí)，離心產(chǎn)物用磷酸鹽緩沖液洗滌3~5次，真空干燥即得到以多聚卟啉納米材料為載體的固定化酶。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種以多聚卟啉納米材料為載體的固定化酶的制備方法，其特征在于：步驟（2）中，交聯(lián)劑戊二醛溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5~10%，反應(yīng)溫度為25~30℃，磷酸鹽緩沖液的pH=?6.0~8.0。