[發明專利]具有生防煙草赤星病的菌株及其發酵方法、煙草赤星病防治復配劑

有效

• 申請號: 202011315175.3
• 申請日: 2020-11-20
• 公開（公告）號: CN112358997B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 蔡永占;高華鋒;何月秋;韓小女;劉冬梅;尚海麗;毛明林;趙崇鈞;李誠;楊松
• 申請（專利權）人: 云南省煙草公司曲靖市公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01N47/12;A01P3/00;A01P1/00;C12R1/125
• 代理公司: 昆明盛鼎宏圖知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 53203
• 代理人: 許競雄

1.一種具有生防煙草赤星病、煙草青枯病功能的菌株，其特征在于，所述菌株為菌株WSWFJ35，保藏登記號為：CGMCC No.20142；所述菌株為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）。

2.一種煙草赤星病防治復配劑，其特征在于，包括：如權利要求1中 所述菌株WSWFJ35的發酵液、低毒化學農藥和助劑；低毒化學農藥稀釋后與混有助劑的發酵液混合后，得到所述復配劑；

低毒化學農藥的用量為該農藥正常用量減半；

發酵液按使用倍數稀釋后加入；

所述低毒化學農藥為10wt.%多抗霉素可濕性粉劑。

3.根據權利要求2所述的煙草赤星病防治復配劑，其特征在于，所述菌株WSWFJ35的發酵液中有效活菌數在2.0×10⁸cfu/g以上。

4.根據權利要求2所述的煙草赤星病防治復配劑，其特征在于，所述助劑為潤濕助劑；所述助劑的加入量為菌株WSWFJ35發酵液質量的千分之一。

5.一種如權利要求1所述菌株的發酵方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）菌種活化：在LB固體培養基上活化12~16h，得到活化菌株；

2）種子液制備：將活化菌株接種至LB液體培養基中，在30~40℃下，并在轉速為150~170rpm/min條件下培養20~30h，得種子液；

3）發酵液制備：按照菌種、培養液體積比為1：100~150的比例將種子液接種至發酵料培養基中，在35℃~38℃條件下，轉速為100~140rpm/min條件下培養25~30h，得所述菌株的發酵液。

6.根據權利要求5所述的發酵方法，其特征在于，所述LB固體培養基由：細菌學蛋白胨8~12g/L、酵母提取粉3~7g/L、氯化鈉8~12g/L、水1L、瓊脂粉13~18g組成。

7.根據權利要求5所述的發酵方法，其特征在于，所述LB液體培養基由細菌學蛋白胨8~12g/L、酵母提取粉3~7g/L、氯化鈉8~12g/L、水1L組成。

8.根據權利要求5所述的發酵方法，其特征在于，所述發酵料培養基由黃豆粉1.0~1.6重量份、蔗糖0.1~0.5重量份、蛋白胨0.2~0.6重量份、玉米粉0.2~0.6重量份、碳酸鈣0.3~0.9重量份、魚粉0.1~0.3重量份、硫酸銨0.01~0.08重量份、硫酸鎂0.02~0.05重量份、磷酸二氫鉀0.01~0.04重量份、磷酸氫二鉀0.02~0.05重量份、硫酸錳0.01~0.04重量份、氫氧化鈉0.01~0.04重量份、氯化鈉0.02~0.03重量份、消泡劑0.5~1.5重量份組成，并用鹽酸或氫氧化鈉調節所述發酵料培養基的PH至6.8~7.5。

9.一種復配劑施用方法，其特征在于，包括以下步驟：將如權利要求2~4中任一項所述的煙草赤星病防治復配劑噴霧施用于煙葉葉片正反兩面。