[發明專利]一株非洲哈茨木霉Ta97及其在秸稈還田方面的應用

有效

• 申請號: 202011309961.2
• 申請日: 2020-11-20
• 公開（公告）號: CN112322501B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發明（設計）人: 吳曉青;張新建;周方園;趙曉燕;張廣志;范素素;王加寧
• 申請（專利權）人: 山東省科學院生態研究所（山東省科學院中日友好生物技術研究中心）
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C05F17/20;C12R1/885
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 牟京霞

1.一株非洲哈茨木霉Ta97，其特征在于，該菌株的拉丁文分類命名為：Trichoderma afroharzianum，該菌株已于2020年07月14日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院，保藏編號：CGMCCNo. 19930。

2.權利要求1所述的非洲哈茨木霉Ta97在秸稈還田方面的應用，其特征在于，所述應用為對秸稈進行降解。

3.如權利要求2所述的應用，其特征在于，具體為以非洲哈茨木霉Ta97制備的菌劑在秸稈還田方面的應用。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，以非洲哈茨木霉Ta97制備的菌劑，具體為非洲哈茨木霉Ta97可濕性粉劑，在該可濕性粉劑中，有效活菌數≥5×10⁹ cfu/g。

5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，非洲哈茨木霉Ta97可濕性粉劑的制備方法，過程如下：

（1）種子液的制備：將-80℃保藏的Ta97接種于PDA固體平板，25℃活化3天，在菌落邊緣取菌絲再次接種于PDA平板中，25～28℃培養3天，再重復取菌絲培養一次，即為活化的菌株；將活化好的菌株在PDA平板上25～28℃、12小時光照12小時黑暗條件下培養10天，制備10⁷個/mL的分生孢子懸濁液，以1:100體積比接種于PDB培養液，25℃、180 rpm條件下震蕩培養40～60小時，即為種子液，種子液的活菌數1×10⁴～1×10⁵ cfu/mL；

（2）木霉菌粉制備：種子液以體積百分比12%～22%接入裝有液體發酵培養基的發酵罐中發酵，發酵溫度在12小時之前為28～30℃、12小時之后為24～27℃，初始pH為3.5～5.5，攪拌速度為200～300 r/min，通氣量為10～15 L/min，發酵時間為60～80小時；發酵產物中活菌數為1×10⁸～1×10⁹ cfu/mL；將發酵液經真空冷凍干燥，即為木霉菌粉，其活菌數≥1×10¹⁰ cfu/g；

（3）制劑：將木霉菌粉與助劑按照以下重量份數混合：木霉菌粉30～50份，硅藻土30～50份，潤濕劑2～4份，分散劑3～6份，粘著劑0.2～0.5份，硫酸鋅1～2份；將上述組分混勻，即可。

6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，在步驟（2）中，液體發酵培養基按下述重量份數的組分組成：爆破玉米秸稈粉50～100份，爆破小麥秸稈粉50～100份，麥麩粉30～50份，葡萄糖10～30份，(NH₄)₂SO₄ 0.5～1份，KH₂PO₄ 0.02～0.04份，MgSO₄·7H₂O 0.03～0.05份，水5000～8000份。

7.如權利要求5所述的應用，其特征在于，在實驗室條件下對秸稈的降解試驗中，秸稈在30天內的平均失重率達到80.40%，在大田試驗中，秸稈在30天內能夠充分降解，達到腐熟4級。