[發明專利]一種金茵利膽口服液指紋圖譜及其建立方法

有效

• 申請號: 202011308904.2
• 申請日: 2020-11-20
• 公開（公告）號: CN112526014B
• 公開（公告）日: 2022-12-16
• 發明（設計）人: 王信;李彩東;趙麗娟;潘新波;張偉;王艷紅;郭亮
• 申請（專利權）人: 蘭州市第二人民醫院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 深圳紫晴專利代理事務所(普通合伙) 44646
• 代理人: 陳映輝

1.一種金茵利膽口服液指紋圖譜的建立方法，其特征在于：所述建立方法的具體步驟如下：

(1)供試品溶液的制備：采用體積百分比濃度為50％的甲醇溶液對金茵利膽口服液進行超聲提取并過濾，得到供試品溶液；

(2)指紋圖譜的制作：采用高效液相色譜法對供試品溶液進行測試，由得到的色譜數據生成金茵利膽口服液指紋圖譜；

其中，所述高效液相色譜法中的色譜條件為：菲羅門雙子星C₁₈柱，規格為：5μm，4.6×250mm、月神C₁₈柱，規格為：5μm，4.6×250mm、迪馬二代鉆石C₁₈柱，規格為：5μm，4.6×250mm或Waters symmetry C₁₈柱，規格為：5μm，4.6×250mm；檢測波長：254nm；進樣量5-20μl，柱溫：20-35℃，流速：0.9-1.1ml/min；

以乙腈為A相，體積百分比0.1％磷酸水溶液為B相進行梯度洗脫；

所述梯度洗脫的程序為：

0-50min，流動相A為7％，流動相B為93％；

50-60min，流動相A由7％勻速變為33％，流動相B由93％勻速變為67％；

60-67min，流動相A由33％勻速變為100％，流動相B由67％勻速變為0％；

67min，流動相A為100％，流動相B為0％。

2.根據權利要求1所述的一種金茵利膽口服液指紋圖譜的建立方法，其特征在于：所述高效液相色譜法中的色譜條件為：迪馬二代鉆石C₁₈柱，規格為：

5μm，4.6×250mm；檢測波長：254nm；進樣量10μl，柱溫：25℃，流速：1ml/min；以乙腈為A相，體積百分比0.1％磷酸水溶液為B相進行梯度洗脫。

3.根據權利要求1或2所述的一種金茵利膽口服液指紋圖譜的建立方法，其特征在于：步驟(1)中，所述金茵利膽口服液的制備方法為：除大黃外，全方混合后加10-12倍重量水，浸泡30-45min，煎煮1小時，過濾，濾渣加大黃，加入8-10倍重量水，繼續煎煮30-45min，濾過，合并煎煮液，減壓濃縮至每毫升相當于原藥材1.0g。

4.根據權利要求1或2所述的一種金茵利膽口服液指紋圖譜的建立方法，其特征在于：步驟(1)中，所述過濾是采用微孔濾膜進行過濾，所述微孔濾膜的孔徑為0.22-0.45μm。

5.根據權利要求3所述的一種金茵利膽口服液指紋圖譜的建立方法，其特征在于：步驟(1)中，所述過濾是采用微孔濾膜進行過濾，所述微孔濾膜的孔徑為0.22-0.45μm。

6.根據權利要求1或2所述的一種金茵利膽口服液指紋圖譜的建立方法，其特征在于：還包括配制對照品溶液，所述對照品溶液的配制方法包括：分別取沒食子酸對照品、綠原酸對照品、夏佛塔苷對照品、甘草苷對照品、柚皮苷對照品、新橙皮苷對照品、鹽酸巴馬汀對照品、鹽酸小檗堿對照品、甘草酸銨對照品，精密稱定，加純甲醇分別制成鹽酸小檗堿40mg/ml、沒食子酸15mg/ml、夏佛塔苷80mg/ml、柚皮苷75mg/ml、新橙皮苷80mg/ml，甘草酸氨70mg/ml、鹽酸巴馬汀40mg/ml、氯原酸70mg/ml、甘草苷70mg/ml溶液，即得。

7.根據權利要求3所述的一種金茵利膽口服液指紋圖譜的建立方法，其特征在于：還包括配制對照品溶液，所述對照品溶液的配制方法包括：分別取沒食子酸對照品、綠原酸對照品、夏佛塔苷對照品、甘草苷對照品、柚皮苷對照品、新橙皮苷對照品、鹽酸巴馬汀對照品、鹽酸小檗堿對照品、甘草酸銨對照品，精密稱定，加純甲醇分別制成鹽酸小檗堿40mg/ml、沒食子酸15mg/ml、夏佛塔苷80mg/ml、柚皮苷75mg/ml、新橙皮苷80mg/ml，甘草酸氨70mg/ml、鹽酸巴馬汀40mg/ml、氯原酸70mg/ml、甘草苷70mg/ml溶液，即得。