[發(fā)明專利]抗蟲基因及其用途有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202011308346.X | 申請(qǐng)日： | 2020-11-19 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN112391391B | 公開（公告）日： | 2022-12-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王正亮;俞曉平;付賢樹 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)計(jì)量大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N15/12 | 分類號(hào)： | C12N15/12;C12N15/80;C12N1/15;A01N63/30;A01P7/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 杭州橙知果專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 33261 | 代理人： | 杜放 |
| 地址： | 324306 浙江省杭*** | 國(guó)省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 基因 及其 用途 | ||
1.一種抗蟲基因，其特征在于，所述抗蟲基因?yàn)镹lserpin1基因，所述抗蟲基因能夠顯著提升金龜子綠僵菌對(duì)褐飛虱的毒力，所述Nlserpin1基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述Nlserpin1基因核苷酸序列編碼的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一種提高殺蟲真菌毒力的方法，其特征在于，包括將權(quán)利要求1所述Nlserpin1基因的表達(dá)盒導(dǎo)入金龜子綠僵菌基因組中使其有效表達(dá)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，將Nlserpin1基因片段克隆至真菌表達(dá)載體pAN52-1N中，使其位于構(gòu)巢曲霉三磷酸甘油醛脫氫酶基因的啟動(dòng)子PgpdA和終止子TtrpC之間，獲得pAN52-Nlserpin1質(zhì)粒；利用XbaI單酶切pET29b-Bar質(zhì)粒，將切下的草丁膦抗性基因bar表達(dá)元件PgpdA-bar-TtrpC導(dǎo)入同樣經(jīng)XbaI單酶切并去磷酸化的pAN52-Nlserpin1中，篩選獲得Nlserpin1和bar基因兩個(gè)表達(dá)框方向相同的雙元質(zhì)粒，所述雙元質(zhì)粒經(jīng)HindIII線性化后通過PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入金龜子綠僵菌野生株中。
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